Отдел продаж

Телефоны: (3532) 25-27-22, 93-60-02, 93-50-02

E-mail: [email protected]

г.Оренбург, ул.Беляевская, д.50/1, стр.1

 

Разное

Фунгицид для стен: Способы борьбы с плесенью на стенах: фунгициды, уф-лампы, народные средства

Содержание

Средство от плесени – лучшие препараты для борьбы с черным грибком

Выбирая средство от плесени, важно помнить о том, что бороться нужно не только с последствиями. Прежде предстоит найти причины появления черного грибка, устранить их и только потом обрабатывать пораженные участки химическими составами или народными средствами. О том, какие из них самые эффективные, расскажем в этой статье, перечислим основные факторы провокаторы поражения, раскроем пути их ликвидации.

Грибок на стенах должен быть уничтоженИсточник klining-mitino.ru

Причины проблемы

Прежде чем убрать плесень со стены или с потолка, нужно выяснить, откуда она взялась, почему появилась. Существует несколько факторов, которые можно записать в «виновники» возникновения проблемы:

  • Первое – это влажность. Грибок любит появляться там, где постоянно скапливается конденсат. Спровоцировать его формирование способна плохая изоляция, присутствие мостиков холода, повреждение водопровода или канализации.
  • Второе – отсутствие естественной вентиляции в квартире или в доме. Когда на рынке появились пластиковые окна, жилья, пораженного грибком, стало намного больше. Они поспособствовали формированию замкнутого пространства, в котором полностью стала отсутствовать приточная вентиляция. Современные модели пластиковых окон лишены такого недостатка. В них установлены специальные клапаны, пропускающие в дом свежий воздух.
  • Сырость подвалов – еще один источник плесени. Если они проветриваются нерегулярно, быстро появляется грибок на стенах. Отсутствие света стимулирует описываемые процессы, поэтому развиваться проблема начинает именно с этих мест. В частном доме источником плесени может стать неправильно утепленная кровля.

Конденсат – главная причина появления грибкаИсточник st03.kakprosto.ru

  • Промерзание стен. Оно случается, когда жилье в зимнее время не отапливается, или отапливается плохо. Внутри помещения на отвесных поверхностях по углам комнат из-за этого быстро появляется иней или даже лед. Когда он растаивает естественным образом, под ним обнажается черная поверхность. Выводить плесень на станах без ремонта отопления не имеет смысла.

Еще один источник проблемы – потоп. Если соседи сверху постоянно заливают нижние квартиры, там обязательно поселится грибок. Когда случаются единичные случаи, это не страшно, скорее всего, устранение причин протечек позволит предотвратить опасное поражение. Систематическое заливание сформирует благоприятные условия для размножения и развития грибка. Это нужно учитывать.

Систематический потоп соседей способен спровоцировать появление грибкового пораженияИсточник www.permexpertiza.ru

Варианты устранения поражения

Борьба с плесенью должна вестись по всем фронтам. Первым делом нужно найти источник сырости, устранить его (заменить трубы, почистить канализацию, заново перекрыть крышу или правильно утеплить стены). Затем идет просушка пораженного участка и только потом можно производить обработку средствами для удаления грибка. Знания о том, как убрать плесень со стен, пола и потолка, помогают предотвращать самые распространенные ошибки, приводящие к появлению обратного результата. Часто именно неправильные действия становятся причиной распространения поражения.

Удалять грибок к поверхности бетона или кирпичной кладки проще, чем с дерева. И все потому, что влага проникает в самые глубокие слои древесины и создает благоприятные условия для развития патогенного микроорганизма. Бетон очень быстро промокает, но его гораздо легче просушить. В зимнее время года для этих целей можно включить тепловую пушку. Дерево – это органика. Под действием влаги оно начинает гнить. Продукты распада – идеальный источник питания для плесени. Поэтому лучшее средство от грибка на стенах, сложенных их бревен, это профилактическая обработка. Целесообразнее использовать растворы, предупреждающие развитие грибка. «Лечить» уже пораженное дерево практически невозможно.

Поражённое грибком деревоИсточник beton-house.com




Чем лучше бороться

Препараты, которые используются сегодня для устранения обозначенной проблемы, относятся к группе антисептиков. Химические составы продаются в садовом или в хозяйственном магазине. Есть народные средства. У каждого состава присутствуют свои преимущества и недостатки. Знания о них помогают выбрать самый эффективный способ борьбы с неприглядными черными пятнами.

Народные средства хороши тем, что они готовятся из компонентов, которые всегда есть в доме под рукой. Это уксус, спирт, марганцовка, хлорка, перекись водорода, любые другие вещества, обладающие антисептическими свойствами. Из каждого из них можно сделать достаточно эффективное средство. Для этого нужно сто грамм компонента растворить в литре воды. Затем взять губку, обильно смочить в растворе, и ею промыть пораженную поверхность. Остатки раствора залить в распылитель и разбрызгать по только что вымытому участку.

Проще всего разбрызгать уксус на плесеньИсточник www.thegazette.com

Уксус 70% стоит использовать в чистом не разбавленном виде. Средство просто заливается внутрь распылителя и при помощи него наносится на час, а потом смывается губкой и чистой водой.

Хлоркой можно обрабатывать пораженное дерево. После смывать ее не нужно. Выбирая ее, важно помнить, что средство имеет достаточно агрессивную формулу, способную расщепить материал и выбелить его лицевую поверхность. Поэтому перед использованием специалисты советуют проводить пробный тест на каком-нибудь невидимом участке.

Для обработки бетонных поверхностей больше всего подходит бура. Она разводится с водой в пропорциях 1х3, затем готовым раствором промачивается пораженной участок. Если грибок успел поникнуть глубоко в структуру бетона, придется повторить несколько таких процедур.

В особо тяжелых случаях разрешено смешивать сразу несколько компонентов и готовить самостоятельно противогрибковый раствор. Для этого нужно смешать грамм пятьдесят хлорки, три больших ложки натрия фосфата и четыре литра воды.

Бура техническая для борьбы с черным грибкомИсточник alfalme.com

Любое народное средство от плесени и грибка эффективно только в том случае, если поражение еще не успело распространиться, если оно занимает маленькие участок и захватывает только верхний слой штукатурки или обоев. Когда проблема приобретает масштабный характер, нужно делать выбор в пользу сложных химических составов.

Специализированные средства

В магазинах можно найти целый класс антисептиков, способных успешно бороться с любыми видами плесневелых грибов. Они стоят дороже уксуса или перекиси, но пользы от них больше. У каждого – своя специфика применения.

Так, например, «Биотол-спрей» часто используется там, где постоянно присутствует высокий порог влажности. Он идеально подходит для профилактической обработки прачечных, ванных комнат, крытых бассейнов. Им обрабатывают службы коммунального хозяйства уличные объекты (заборы, памятники). Чуть-чуть уступает этому средству по мощности препарат под названием «Олимп стоп-плесень». Это лучший препарат от плесени на стенах подвалов, погребов, других помещений, где сыро и нет дневного света. Профилактическая обработка позволяет предотвратить поражение. Им можно проводить и «лечение» уже годами формирующегося процесса.

«Биотол-спрей» – эффективное химическое средство для борьбы с грибковым поражением стенИсточник i.simpalsmedia.com

Специально для борьбы с черной плесенью был разработан препарат «Фонгифлюид Альпа». Это фунгицид нового поколения. Когда плесень была успешно устранена, еще какое-то время нужно обрабатывать стены для профилактики повторного поражения. Для этого лучше использовать жидкое средство «Дали».

В видео специалист рассказывает о препарате «Фонгифлюид Альпа»:

Что будет, если плесень не удалять

Черные пятна на стенах – это не только эстетическая проблема. Они угроза здоровью человека. Грибок быстро развивается. Он размножается посредством спор, и во время этого процесса они разлетаются по всему дому. Каждый из нас, вдыхая споры плесени, рискует столкнуться с ухудшением самочувствия. Подобные микроорганизмы способны спровоцировать развитие сложнейших заболеваний дыхательной системы, в том числе и бронхиальную астму.

Плесень опасна для человекаИсточник www.kras-ref. ru

Если оставить грибок и ничего с ним не делать, со временем он полностью разрушит пораженную поверхность и повредит строительные конструкции. Нет смысла откладывать подобное мероприятие. Как только в комнате появился характерный затхлый запах, нужно начинать искать первые следы поражения. Теперь, зная о том, как убрать плесень, бороться с ней будет намного проще.

В видеоролике показан один из вариантов, как на 100% избавиться от плесени в доме:

Расход водоэмульсионной краски на 1м² стены за 2 раза: что учесть при расчете

Коротко о главном

Любое средство от плесени и грибка на стенах работает одинаково: одно проникает в структуру материала, убивает патогенный микроорганизм и не дает поражению дальше распространяться. Существует большое количество химических препаратов и растворов, которые можно готовить из уксуса, хлора, перекиси водорода. Их применение способно устранить проблему появления малопривлекательных черных пятен, но без ликвидации причин их возникновения борьба окажется бессмысленной. Грибок будет снова и снова появляться, создавать угрозу для здоровья человека.

Как удалить плесень со стен и потолков?

03.09.2019

Возврат плесени на стены и потолок является проблемой для многих домашних хозяйств. Это вызвано слишком высокой влажностью в помещениях в сочетании с отсутствием надлежащей вентиляции — часто виноваты неправильные строительные конструкции, такие как протекающие окна или протекающие крыши. Борьба с плесенью — непростая задача, и чтобы ее решить, нам нужно собрать немного информации о проблеме. Ниже приведены некоторые советы по удалению плесени.

Список вещей — как убрать плесень со стен?

Самая важная вещь, которую мы должны экипировать, это, конечно, фунгицид. Вы можете выбрать любой препарат из магазина. Другой вариант — купить уксус или хлорный отбеливатель, который также сможет удалить плесень.

Щетка с жесткой щетиной и теплая вода — другие вещи, которые будут полезны в борьбе с плесенью — вместо щетки вы также можете использовать грубую губку. Бутылка с распылителем, или просто распылитель, также будет полезна.

Домашние средства для удаления плесени со стен и потолков. Как сделать

Чтобы удалить плесень, которая появляется в вашем доме, вам не нужно вызывать команду специалистов для помощи. Простые, домашние способы, которые нам дали тети и мамы, прекрасно работают и намного дешевле, чем нанимать людей, которые сделают это за нас. Вот некоторые из них.

Уксус — безопасный и традиционный

Уксус является популярным ингредиентом, который у всех есть на кухне. В дополнение к кулинарному применению, он также имеет фунгицидное применение. Чтобы обработать плесень уксусом, налейте ее в бутылку с распылителем и распылите стенку, где развивается мицелий, и через несколько минут вытрите плесень со стены теплой водой и повторите действие. Уксус имеет неприятный, едкий запах, который, однако, скоро испаряется.

Отбеливатель

Еще один способ избавиться от плесени — использовать хлорный отбеливатель. Смесь для очистки стены или потолка должна быть приготовлена следующим образом: половину стакана отбеливателя и треть стакана стирального порошка тщательно перемешайте в четырех литрах воды и готово! 

Используя грубую губку и вышеупомянутую смесь, вымойте стену, пока грибок не исчезнет. После этого вымойте стену еще раз — на этот раз теплой водой. При использовании отбеливателя вы должны принять меры предосторожности, потому что это опасное вещество. Рекомендуется защищать руки перчатками.

Специальные меры

Другой способ теперь требует осмотра ассортимента специализированных магазинов, где мы подберем подходящее средство против плесени. Это немного более дорогой метод, потому что цены на специализированные препараты часто высоки, но когда уксус и отбеливатель не справляются, стоит обратиться к такому способу.

Процедура довольно проста. Начните с удаления плесени с помощью щетки с жесткой щетиной и теплой водой. Как только вы избавитесь от неприглядного негодяя, намажьте стену фунгицидом там, где была плесень, и около полуметра вокруг этого места.

Процедуры по размещению и удалению плесени

Удаление плесени — это не только смазывание места ее появления препаратом или царапанием на стене, но также ряд действий, которые позволят нам выполнить эту работу безопасным и практичным способом. Вот коллекция советов, которые помогут вам удалить плесень раз и навсегда.

Расположение плесени

Извержения мицелия чаще всего появляются в углах комнат, а некоторые из них перемещаются на значительную часть стены или потолка. Проблема, однако, не распространяется только на видимые места. Если вы заметили плесень, постарайтесь тщательно обыскать всю комнату. Для этого переместите шкафы, столы, кровати и другое оборудование или мебель, чтобы проверить, также мицелий не растет позади них. Вы также можете взглянуть под пол.

Удаление плесени и профилактика

В случае повторяющейся плесени процедура удаления должна быть, конечно, повторена. Тем не менее, когда плесень возвращается часто, наступает время принимать контрмеры. Мицелий появляется в невентилируемых и влажных местах. Причин слишком высокой влажности может быть несколько: протекающая крыша, окна или даже пар на кухне. Проверьте герметичность крыши и окон и откройте окно или включите вытяжку во время приготовления пищи. Чтобы снизить риск образования / повторного появления плесени, обеспечьте достаточную вентиляцию; оконные вентиляторы или механическая вентиляция позаботятся об этом. 

Стоит убедиться, что плесень встречается только на штукатурке или также под ней. Мы будем использовать молоток для этого. Если место издает «глухой» звук, это означает, что гриб также попал под штукатурку, и для предотвращения повторяющейся проблемы необходимо будет удалить штукатурку.

Меры предосторожности

Борясь с плесенью, стоит позаботиться о нашем здоровье и безопасности. Многие из фунгицидов являются едкими и / или имеют неприятный запах. С помощью нескольких правил вы защитите себя от опасной ситуации при удалении плесени.

Вещества, которые могут нарушить целостность нашей кожи и вызвать раздражение, являются стандартными фунгицидами, купленными в магазине, и всевозможными отбеливателями. При работе с ними не забывайте всегда надевать длинные резиновые защитные перчатки. Миски, кисти и губки после них следует использовать только для веществ с аналогичным эффектом или выбрасывать после использования. 

Также будет полезно использовать маску и очки для рта и носа, чтобы вещество не попадало в наши слизистые. 

Чистящие средства и обычный уксус выделяют неприятный, острый запах. Для некоторых из них пары могут быть опасными. Чтобы защититься от этого, всегда надевайте маску на рот и нос и используйте препараты в хорошо проветриваемых помещениях. При удалении грибка окна должны быть открыты все время, а также через некоторое время после него.

Краски с плесенью

Дополнительной защитой от появления плесени является использование соответствующей краски. Рынок предлагает широкий ассортимент красок для предотвращения образования грибка на стенах. К ним относятся бактерицидные краски, богатые ионами серебра, которые предотвращают рост бактерий, типичные фунгицидные краски, предотвращающие образование нежелательных покрытий на поверхности стены, или силикатные краски — последние имеют щелочную реакцию, которая не способствует развитию грибков.

Хорошим и менее обременительным выбором является использование красок, предназначенных для влажных помещений, таких как ванные комнаты или прачечные. Благодаря своим гидрофобным свойствам они не пропускают влагу и воду так же, как обычные краски.

Антисептик для стен или как избавиться от плесени и гибка навсегда | Свекрови.Нет

Антисептики для стен от плесени и грибка бывают водорастворимыми и комбинированными. Выделяют также препараты на органической основе. Для обработки стен можно применять препараты Церезит в виде концентрата, Капатокс, Нортекс-дезинфектор, Гамбит антисептик. В зависимости от дезинфицирующего состава его можно добавлять в бетонный и цементный растворы, штукатурку на этапе замешивания. В борьбе с плесенью важно обеспечить хорошую вентиляцию помещений.

Обработка стен (источник фото — Яндекс.Картинки)

Обработка стен (источник фото — Яндекс.Картинки)

Ставьте 👍 и подписывайтесь на канал « Свекрови.Нет « . Это позволит нам публиковать больше интересных статей.

Разновидности антисептических средств

На этапе строительства для предотвращения разрушений бетона, которые происходят под воздействием таких микроорганизмов, как грибок и плесень, его необходимо обрабатывать антисептиком на глубине до полутора метров. Обладая дезинфицирующими и бактерицидными свойствами, он препятствует размножению на поверхности вредителей. Если заражение произошло, то проводят так называемое «лечение»:

  • антисептическим препаратом против плесени;
  • антисептиком против грибка;
  • комплексным антибактериальным средством, одновременно уничтожающим плесень и грибок.

Результат обработки стен (источник фото — Яндекс.Картинки)

Результат обработки стен (источник фото — Яндекс.Картинки)

Классификация по типу основы

Водные антисептики относительно безопасные и нетоксичные, поэтому часто используются для обработки жилых помещений (квартир, домов). К таким разновидностям относят медный купорос, фторид натрия, кремнефтористый натрий вместе с известью, алебастр, а также комплексные смеси. Основой для антисептика является вода, поэтому средства могут смываться с поверхности. В связи с этим обработку бетонных конструкций водными составами рекомендуется проводить в закрытом помещении. Если она осуществляется на улице, необходимо дополнительное нанесение смолы или лака. Медный купорос – безопасный, хорошо растворимый в воде антисептик этого класса. Единственным нюансом его использования является то, что сульфат меди способен разъедать металл.

Преимущества медного купороса относительно других водорастворимых антисептиков заключаются в его слабом запахе и невозможности возгорания.

При работе с фтористым натрием нужно быть крайне осторожным, поскольку химическое вещество токсично и является ядом для человека, животных и даже насекомых. Поэтому следует смешивать антисептическое средство на основе фтористого натрия с алебастром, известью или цементом. Также хороший эффект дает разведение в дождевой воде. Кремнефтористый натрий – плохорастворимое антисептическое средство. Добавлением карбоната кальция или аммиака можно получить фтористый натрий.

Удаление плесени

Удаление плесени

Органические антисептики – самые токсичные для человека. Идеально подходят для обработки железобетонных и деревянных поверхностей. При работе с антисептиком большое значение имеет глубина его проникновения, которая зависит от породы дерева. Чем она больше, тем эффективнее воздействие. Органические виды не разрушают металл, поэтому применяются для обработки поверхностей из этого материала. Из-за высокого уровня токсичности работы необходимо проводить в защитной маске и перчатках. Древесину снаружи нужно покрывать толстым защитным слоем, обладающим высокой герметической способностью.

К маслянистым антисептикам относят антраценовое масло, карболинеум, крезотовое каменноугольное масло, торфяные, сланцевые, коксовые смолы. Основа полностью исключает вымывание водой. Такие средства часто используются для обработки нежилых помещений, поскольку имеют специфический неприятный запах, проводить покрасочные работы после нанесения невозможно до полного выветривания антисептика. Вещества легко воспламеняются и оставляют черный след.

Комбинированные антисептики очень токсичны и небезопасны в использовании, поэтому для обработки поверхностей в быту запрещены и применяются только в промышленных масштабах. Они представляют собой сильно концентрированный раствор, который разработан для лечения поверхностей от воздействия биологических разрушителей. В профилактических целях используют концентрат.

Для проекта важна Ваша благодарность в виде 👍 , подписок на канал Дзен, на наш Сайт, в группу VK и в Facebook, на канал в Телеграмме, на Youtube, в Instagramm. Заранее благодарны Вам! 🙂

Автор — Марина Веревкина , Источник

Читать еще: Как самостоятельно снять клавиатуру с ноутбука для чистки или замены

Как навсегда избавиться от плесени на стенах

Плесень на стенах жилых помещений не только портит их внешний вид, но и негативно влияет на здоровье проживающих. Чтобы от нее избавиться, недостаточно только применять средство от плесени на стенах, необходимо также устранить причины ее появления, иначе плесневый грибок разовьется вновь. Узнайте наиболее эффективные способы, как избавиться от плесени на стенах, которые помогут решить эту проблему раз и навсегда.

Чем опасна плесень

Многие слышали о том, что плесень вредна, но не знают конкретно, чем опасна плесень в доме. Она опасна тем, что выделяет в воздух огромное количество спор. В замкнутом пространстве помещений их количество на единицу объема может в тысячи раз превышать допустимые нормы. Загрязненный спорами воздух вреден для всех, но особенно он опасен для людей с ослабленным иммунитетом:

  • носителей ВИЧ;
  • недавно перенесших операцию;
  • во время прохождения и после химиотерапии;
  • часто болеющих респираторными заболеваниями;
  • страдающих астмой и хроническим бронхитом;
  • аллергиков;
  • маленьких детей;
  • пожилых.

Нетоксичная плесень на стенах приносит вред тем, что провоцирует аллергические реакции – першение в горле, кашель, что может привести к развитию аллергического бронхита и астмы. Но существуют также токсичные виды плесневых грибков, споры которых способны разрастаться в легких и других органах, образуя опухолеподобные образования. Заболевания, вызванные спорами токсичной плесени, могут привести к самым тяжелым последствиям, вплоть до летального исхода. Среди грибков, развивающихся в помещениях, к категории токсичных относится стахиботрис – черная плесень на стенах, вред ее для здоровья так велик, что квартиры, в которых она поражает от 20% площади (учитываются также трубы и другие поверхности), признаются непригодными для проживания.

Плесень в квартире

Появление плесени в квартирах многоэтажных домов в подавляющем числе случаев происходит из-за разгерметизации межпанельных швов. Признаком этого являются чернеющие углы на стыках наружных стен. Положение могут усугублять пластиковые окна, которые наглухо закупоривают помещения и в холодный сезон постоянно «плачут» конденсатом.

Черная плесень на стенах должна стать сигналом к принятию немедленных мер по борьбе с плесенью в квартире, ведь она чрезвычайно опасна для здоровья. Заказав специалистам герметизацию межпанельных швов, а при необходимости – и наружное утепление стен, вы устраните корень проблемы, после чего справиться с грибком на стенах не составит большого труда.

Причины появления плесени

Если появляется плесень на стенах, причина этого – высокая влажность воздуха в помещении. Там где сыро, всегда раньше или позже заводятся плесневые грибки, ведь их споры могут быть занесены насекомыми, на верхней одежде, или просто попасть в дом с уличным воздухом. Повышение влажности в помещениях бывает обусловлено внутренними и внешними  факторами. Внутренние факторы – это, как правило, неправильные действия жильцов вкупе с плохой вентиляцией:

  • постоянная сушка в квартире большого количества постиранного белья;
  • слишком большое число комнатных растений;
  • плохое проветривание, особенно если установлены герметично закрывающиеся металлопластиковые окна;
  • плохая вентиляция в ванной и других помещениях повышенной влажности;
  • отсутствие или недостаточность отопления;
  • протекающие трубы и затопления по вине соседей.

Большинство внутренних причин легко устранимы.

Внешние факторы устранить сложнее. К ним относятся все причины отсыревания наружных стен:

  • на верхних этажах – протекающая крыша;
  • на нижних этажах – подтапливаемый подвал;
  • плохая гидроизоляция фундамента в частных домах;
  • плохая гидроизоляция межпанельных швов, а также наружных стен из пористых бетонов;
  • отсутствие наружного утепления стен там, где оно необходимо.

Если беспокоит плесень в квартире, причины появления которой относятся к внешним, то для избавления от нее потребуются значительные расходы. Но ради здоровья членов семьи стоит выделить средства на ремонт крыши или подвальных труб, гидроизоляцию или утепление стен. Ведь только после устранения причин сырости удастся полностью избавиться от грибка.

Отсутствие наружного утепления — одна из причин появления грибка

Одна из распространенных причин сырости наружных стен – их недостаточные  теплоизоляционные качества. Плохо удерживающие тепло стены в холодный период года переохлаждаются, и точка росы (температура образования конденсата из водяных паров) перемещается к их внутренней поверхности. В результате появляется сырость, создающая идеальные условия для развития плесневых грибков.

Наружное утепление стен делает их сухими и теплыми, а значит – неуязвимыми для плесневых грибков. При правильно выполненном утеплении точка росы перемещается к наружной поверхности и находится в утепляющем слое или под ним. При этом внутренняя поверхность стены остается сухой, поэтому вопрос, чем вывести плесень в квартире, вас будет волновать только один раз. Ведь после утепления стен и обработки пораженных участков фунгицидами грибок больше не появится. К тому же наружное утепление стен дает возможность существенно экономить на отоплении, а значит, расходы на него за несколько лет окупятся. В результате вы получите двойную пользу – и для здоровья, и для экономии бюджета.

Борьба с плесенью

Удаление плесени – это вопрос не только эстетики, но и здоровья, поэтому борьбу с ней нельзя откладывать. Ведь чем дольше вдыхать зараженный спорами воздух, тем больше риск развития вызываемых ими заболеваний. Для осуществления мер по борьбе с плесенью понадобятся:

  • средства индивидуальной защиты – респиратор, резиновые перчатки, закрытая одежда и головной убор;
  • инструменты – шпатель, скребок, металлическая щетка, емкость для воды, губка, малярная кисть;
  • средства от плесени на стенах.

Для полного уничтожения плесени также может понадобиться электродрель или молоток с зубилом, в случаях, если грибок пророс в толщу штукатурки. Также не лишним будет строительный фен или тепловентилятор для ускорения просушки проблемного участка.

Удаление плесени со стен выполняется в следующем порядке:

  1. Наденьте респиратор и резиновые перчатки, покройте голову плотным головным убором.
  2. Проблемное место обильно смочите водой, это предотвратит выбросы спор в воздух.
  3. Шпателем снимите обои, скребком и металлической щеткой удалите пораженную грибком шпаклевку. Не забывайте смачивать поверхность водой, чтобы предотвратить распространение спор по помещению.
  4. Если грибок проник вглубь штукатурки, то ее нужно удалить до появления чистого материала.
  5. Образовавшийся мусор нужно убрать.
  6. Просушите расчищенный участок стены строительным феном.
  7. Обработайте просушенную поверхность антигрибковым средством в 2-3 приема, каждый раз выдержав необходимое время, чтобы раствор хорошо впитался и просох.
  8. После высыхания последнего слоя нанесите противогрибковую грунтовку.
  9. Восстановите удаленную штукатурку и шпаклевку с помощью материалов с антигрибковыми добавками.
  10. Клеем с добавлением фунгицида приклейте новые обои.

При выполнении работ по борьбе с плесенью нельзя пренебрегать мерами безопасности, также необходимо удалить из комнаты людей, животных и растения. Пользоваться помещением можно не ранее, чем через 24 часа после обработки.

Чем убрать плесень

Сейчас в продаже имеется большое разнообразие фунгицидных средств для обработки стен. Спросите у продавца, чем обработать стены от плесени, и он предложит вам обширный выбор. Все препараты достаточно эффективны, выбирайте тот, который подойдет вам по виду обрабатываемого материала, объему и цене. Только обратите внимание на состав, в нем не должно быть карбендазима – этот токсичный фунгицид запрещен в Европе. Рассмотрим несколько наиболее популярных концентратов для обработки стен от плесени:

  • Ceresit CT 99 предназначен для обработки штукатурки, бетона, кирпича. Обладает хорошей паропроницаемостью. Перед применением разводится водой, наносится кистью.
  • Фонгифлюид Alpa – универсальный концентрат, помимо бетона и кирпича им можно обрабатывать древесину, гипсокартон, керамическую черепицу и плитку. Пропитка паропроницаема, не изменяет визуальные характеристики поверхностей и сохраняет свои фунгицидные свойства в течении двух лет.
  • «Олимп стоп-плесень» предназначен для обработки цементных, кирпичных, каменных, деревянных, гипсокартонных, керамических поверхностей. Не содержит хлора и испаряющихся токсичных соединений. Считается относительно безопасным.
  • «Нортекс-дезинфектор» – средство от плесени на бетонных стенах. Наряду с фунгицидными, обладает также антисептическими свойствами, продлевает срок службы бетона.

Также понадобится грунтовка, шпатлевка и штукатурка с антигрибковыми добавками. Можно купить готовые материалы, либо добавить фунгицид в сухие строительные смеси в соответствии с инструкцией.

Как убрать плесень народными методами

Применение народных методов оправдано, если причины развития грибка не устранены, и обработку стен от плесени приходится делать часто. В таких случаях народные методы имеют преимущество, благодаря своей относительной безвредности.

Избавиться от плесени в доме помогают следующие народные средства:

  • Насыщенный раствор соды, с последующим промыванием раствором столового уксуса.
  • Эмульсия из обычного хозяйственного мыла.
  • Раствор медного купороса, который наносят на плесень с помощью распылителя.
  • Масло чайного дерева, добавленное в воду.
  • Раствор хлора, который получают, разводя водой концентрированный отбеливатель для белья.
  • Трехпроцентная перекись водорода.
  • Смесь спирта с глицерином.
  • Раствор нашатырного спирта.

Все эти средства, за исключением хлора и медного купороса, являются безвредными, ими можно пользоваться часто.

Что делать с плесенью, чтобы избежать повторного появления

Чтобы борьба с плесенью на стенах не превратилась в ежемесячную рутину, необходимо прежде всего искоренить причины ее появления. Ведь если этого не сделать, грибок все равно будет появляться в сырых местах. А если постоянно пропитывать стены химикатами, то это не менее вредно, чем дышать спорами плесневых грибков.

Если у вас плесень на стенах, и что делать с этим вы не знаете, проанализируйте, что привело к высокой влажности воздуха в помещении. Часто ли вы сушите белье в квартире, а может, вы развели в ней целую оранжерею? Или у вас постоянно закрыты пластиковые окна, плохо работает вентиляция в ванной, текут трубы, нет отопления? Чаще всего таких причин оказывается несколько.

Плесень в углах панельного дома – это прямое указание на плохую герметизацию межпанельных стыков. Сырые наружные стены – сигнал о том, что необходимо сделать наружное утепление стен. А может, протекает крыша или сыростью тянет из постоянно мокрого подвала?

Часто под прицелом плесени оказываются частные дома. Если развелась плесень в доме, что делать? Устраните главные причины ее появления – сделайте гидроизоляцию фундамента, наружное утепление стен, отремонтируйте крышу. Чаще проветривайте дом, в жару просушивайте во дворе постели, ковры, это поможет избежать запаха плесени. Устранив причины появления плесневых грибкова и применив антигрибковые средства, вы навсегда забудете об этой проблеме.

Заключение

Чтобы избавиться от плесени на стенах, необходим комплексный подход к этой проблеме. Удаление плесени не даст ожидаемого эффекта, если не устранить причины ее появления. Решив вопросы с утеплением наружных стен, отоплением, гидроизоляцией и вентиляцией, вы не только навсегда избавитесь от плесени, но и оздоровите микроклимат в доме, сделаете свою жизнь более комфортной и приятной.

Защищаем стену от грибка и плесени перед поклейкой обоев

Сырость в помещении может грозить появлением грибковых поражений и плесени на стенах. Бороться с этими проблемами особенно тяжело, если ситуация была уже запущена. Грибок не просто портит внешний вид помещения, он скрывает в себе серьёзную опасность для здоровья обитателей этого помещения. Так что лучше обезопасить себя и провести профилактику появления плесени заранее. Например, сделать это можно перед поклейкой обоев.

Обработка стен защитными составами перед поклейкой обоев

Для того чтобы защитить стены в вашем доме (и ваше здоровье) от пагубного воздействия плесени и грибка, нужно обработать их фунгицидами. Для удобства и практичности их обычно добавляют в грунтовые составы, штукатурку, шпатлёвку или, в крайнем случае, в клей для обоев.

В высокой концентрации фунгициды могут быть опасны для человека и животных, так что нужно быть аккуратным и соблюдать пропорции. Правильное использование таких дезинфицирующих и защитных составов поможет предотвратить появление плесени или грибка.

Можно также воспользоваться народными рецептами, которые включают в себя использование подручных материалов. Такие компоненты наверняка найдутся на кухне или в аптечном шкафчике в любом доме, они менее опасны для жильцов квартиры или дома, но не менее эффективны.

Для получения качественного результата нужно преодолеть несколько подготовительных этапов:

Шаг 1. Тщательно очистите поверхность стены, вымойте её и просушите. Для просушки лучше всего использовать специальные вентиляторы, строительные фены или обогреватели.

Шаг 2. Если вы планируете обрабатывать стены химическими концентратами, то обязательно нужно открыть окна или обеспечить хорошую вентиляцию в помещении. Не забудьте надеть респиратор, защитные очки, перчатки, специальную одежду и головной убор.

Шаг 3. Тщательно просушите стены, на которые был нанесён препарат. К поклейке обоев можно приступать только после полного высыхания защитного состава.

Химические препараты

Проще всего приобрести в магазине грунтовку с особыми добавками, которые защищают стены от появления грибка и плесени. Можно использовать и альтернативы, например, штукатурки с добавками, антисептики, пропитки и т.д.

Вот несколько наиболее популярных препаратов:

  • Milkill. Антисептический состав, уничтожающий плесень. Можно использовать в качестве профилактического средства для кирпичных и бетонных стен перед наклеиванием обоев;
  • Shimmelstopp Dufa. Добавка к штукатурке. Помогает защитить поверхность стен от появления грибковых поражений и чёрной плесени;
  • Барамон С30. Предназначен для обработки поверхностей из дерева. Работает также в качестве защиты стен под обоями от плесени. Преимущества – небольшая стоимость, отсутствие запаха. Для полного просыхания такой пропитке требуется 48 часов.

Народные рецепты

Для профилактики появления плесени или для её удаления можно использовать и народные средства:

  1. Медный купорос. Классика борьбы с грибковыми поражениями и плесенью. Порошок разводят в воде в соотношении 1:100. Полученной смесью обрабатывают все поражённые стены;
  2. Раствор перекиси водорода. Помогает уничтожить грибковые споры и предотвращает их распространение на «здоровые» участки стены. Наносить нужно в неразбавленном виде на стены до поклейки обоев;
  3. Белизна. Это средство содержит в своём составе хлор, который способен уничтожать грибковые споры и плесень. Для обработки стены понадобится раствор Белизны. Средство разводят в пропорциях 1:10 с водой и несколько раз наносят на поражённые участки стены;
  4. Сода. Соду (1 ч. ложку) нужно развести в 300 мл воды. С помощью распылителя раствор наносят на стены до поклейки обоев. Это помогает уничтожить грибковые поражения и устранить неприятный запах сырости и гнили;
  5. Уксус. Уксус 9% нужно несколько раз нанести на поражённые плесенью участки стены. Затем комнату нужно хорошенько проветрить;
  6. Фурацилин. Не особенно популярное, зато хорошо работающее средство при грибке и плесени на стенах. Нужно перемолоть 10-11 таблеток препарата до состояния порошка, а затем развести в 300 мл воды. На сухие стены следует нанести полученную смесь, затем хорошо просушить поверхность. Только после того, как она полностью просохнет, можно приступать к поклейке обоев.

Понравилась статья? Подписывайтесь на наш канал Яндекс.Дзен

Добавить в избранное
Версия для печати

границ | Клеточная стенка грибов: новые противогрибковые препараты и лекарственная устойчивость

Введение

Клеточная стенка является важным компонентом гомеостаза грибковых клеток (Latgé, 2007; Gow et al., 2017). Он также имеет двойной процесс взаимодействия с окружающей средой, который либо отрицательно, либо положительно влияет на выживаемость грибковых клеток. Антигены клеточной стенки индуцируют иммунное распознавание инфицированным хозяином и способствуют фагоцитозу (Roy and Klein, 2012). Некоторые антигены, называемые патоген-ассоциированными молекулярными паттернами (PAMP), распознаются широким спектром рецепторов распознавания паттернов (PRR) на поверхности клетки-хозяина (Roy and Klein, 2012).И наоборот, экологические стрессы приводят к модификациям клеточных стенок, которые препятствуют иммунному распознаванию (Gow et al. , 2017).

Составляя примерно 40% от общего объема грибковой клетки, клеточная стенка гриба образует прочную и прочную сердцевинную основу, в которой различные белки и поверхностные компоненты с волокнистыми и гелеобразными углеводами образуют полимеры, образуя прочную, но гибкую структуру (Munro , 2013; Гоу и др., 2017). Большинство клеточных стенок имеют два слоя: (1) внутренний слой, включающий относительно консервативный структурный скелет, и (2) внешний слой, который более гетерогенен и имеет видоспецифические особенности (Gow et al., 2017). Внутренняя клеточная стенка представляет собой несущий структурный компонент стенки, который сопротивляется значительному внутреннему гидростатическому давлению, оказываемому на стенку цитоплазмой и мембраной (Latgé, 2007). Этот слой включает хитин и глюкан, в которых 50–60% сухой массы клеточной стенки составляет β-(1–3)-глюкан. Структура внешнего слоя состоит из сильно маннозилированных гликопротеинов с модифицированными N- и O-связанными олигосахаридами. Структура этих боковых цепей олигосахаридов различается у разных видов грибов (Shibata et al., 1995; Хобсон и др., 2004).

Поскольку клетки человека не имеют покрывающей стенки, противогрибковые препараты, нацеленные на выработку компонентов клеточной стенки, более селективны и менее токсичны по сравнению с производными азола и амфотерицином В (Patil and Majumdar, 2017). Эхинокандины были первыми системными противогрибковыми средствами, нацеленными на клеточную стенку, нарушая выработку глюканов (Patil and Majumdar, 2017). При инвазивном кандидозе эхинокандины стали важным шагом вперед, позволившим снизить смертность, связанную с этими инфекциями, с низкой токсичностью и малым взаимодействием с другими препаратами (Mora-Duarte et al., 2002; Паппас и др., 2016). Однако внутренняя и приобретенная устойчивость к эхинокандинам ограничивает его полезность, что приводит к исследованиям других мишеней в клеточной стенке грибов для противогрибковой терапии (Hasim and Coleman, 2019).

Динамика клеточной стенки может играть важную роль в развитии резистентности к противогрибковым препаратам, и в связи с этим появляются интересные концепции. Модификации структуры и состава клеточных стенок были исследованы в изолятах Candida и Aspergillus , обладающих устойчивостью к противогрибковым препаратам (Seo et al., 1999; Меса-Аранго и др., 2016). В устойчивых к эхинокандину изолятах Candida описаны модификации поперечных связей β-1,3- и β-1,6-глюканов и более высокое содержание хитина (Perlin, 2015), в то время как более высокий состав β-D-глюкана был обнаружен в устойчивые к амфотерицину В изоляты Aspergillus flavus (Seo et al., 1999).

В этой рукописи мы рассматриваем клеточную стенку грибка как мишень для противогрибковой терапии и, в связи с этим, посещаем модификации клеточной стенки, которые могут быть связаны с устойчивостью к противомикробным препаратам.

Противогрибковые препараты против клеточной стенки грибов

Противогрибковые препараты, нацеленные на клеточную стенку, были разработаны в последние годы (Walker et al., 2011; Chaudhary et al., 2013; Mutz and Roemer, 2016; Hasim and Coleman, 2019). Большинство этих препаратов действуют путем ингибирования β-D-глюкансинтазы, но также разрабатываются ингибиторы якорного пути хитинсинтазы и гликозилфосфатидилинозитол (GPI) (рис. 1А).

Рисунок 1 . (A) Грибковая клеточная стенка и мишени, которые были исследованы для противогрибкового развития: β-D-глюкансинтаза, хитинсинтаза и фермент Gwt1 из пути якоря GPI; (B) Воздействие эхинокандина вызывает стресс клеточной стенки за счет ингибирования β-D-глюкансинтазы.Протеинкиназа C (PKC), высокоосмолярный глицериновый ответ (HOG) и пути Ca +2 -кальциневрина участвуют в ответе на повреждение клеточной стенки и гиперстимуляцию хитинсинтазы. Кальциневрин является белком-клиентом для шаперона Hsp90, а генетический компромисс гена HSP90 снижает механизм толерантности.

Ингибиторы 1,3-β-D-глюкансинтазы

Эхинокандины

Эхинокандины были впервые описаны в 1970-х годах как антибиотические полипептиды, полученные из Aspergillus nidulans (Nyfeler and Keller-Schierlein, 1974). Эти молекулы в основном представляют собой гексапептидные антибиотики с N-связанными цепями ацильных жирных кислот, которые интеркалируют с фосфолипидным слоем клеточной мембраны (Denning, 2003). Этот противогрибковый класс ингибирует β-D-глюкансинтазу, что приводит к уменьшению β-D-глюканов в клеточной стенке после неконкурентного связывания с Fksp-субъединицей фермента (Hector, 1993; Denning, 2003; Aguilar-Zapata). и др., 2015; Перлин, 2015; Патил и Маджумдар, 2017).

Комплекс β-D-глюкансинтазы клеточной стенки грибов состоит из двух основных субъединиц: Fks1p и Rho1p (Mazur and Baginsky, 1996; Aguilar-Zapata et al., 2015). Fks1p представляет собой каталитическую субъединицу, ответственную за образование гликозидных связей (Schimoler-O’Rourke et al., 2003), тогда как Rho1p представляет собой Ras-подобный GTP-связывающий белок, который регулирует активность β-D-глюкансинтазы (Qadota et al. ., 1996).

Ингибирование β-D-глюкансинтазы приводит к гибели клеток видов Candida , в то время как эхинокандины модифицируют морфогенез гиф и оказывают фунгистатическое действие против видов Aspergillus (Bowman et al. , 2002).И наоборот, виды, принадлежащие к порядку Mucorales и базидиомицетам, по своей природе устойчивы к этому классу противогрибковых средств (Espinel-Ingroff, 2003; Aguilar-Zapata et al., 2015).

В настоящее время FDA одобрило три эхинокандина для лечения инвазивных грибковых инфекций: каспофунгин, анидулафунгин и микафунгин (Johnson and Perfect, 2003; Rüping et al., 2008; Pappas et al., 2016). По сравнению с другими противогрибковыми классами эхинокандины проявляют меньшую токсичность для почек или печени, меньшее лекарственное взаимодействие и выведение преимущественно печенью, не требуя коррекции дозы при почечной недостаточности или диализе (Aguilar-Zapata et al., 2015). Однако эхинокандины имеют фармакокинетические ограничения, такие как низкая биодоступность при пероральном введении, высокое связывание с белками и низкое проникновение в центральную нервную систему (ЦНС) (Wiederhold and Lewis, 2003). Новые ингибиторы глюкансинтазы с лучшими фармакокинеическими профилями, в том числе пероральные формы с высокой биодоступностью, находятся в стадии изучения (Davis et al. , 2019).

Резафунгин (CD101, ранее SP3025, Cidara Therapeutics, Сан-Диего, Калифорния, США), эхинокандин нового поколения, в настоящее время проходит Фазу 3 клинических испытаний для лечения кандидемии и инвазивного кандидоза.Это противогрибковое средство является структурным аналогом анидулафунгина, но с холиновой частью, заменяющей полуаминальную группу в положении орнитина C5, что приводит к образованию стабильного соединения с длительным периодом полувыведения (Sandison et al., 2017). Он хорошо растворим в водных системах и имеет период полувыведения более 130 часов у человека по сравнению с 24, 9–11, 10–17 часами периодов полувыведения анидулафунгина, каспофунгина и микафунгина соответственно (Kofla and Ruhnke, 2011). ; Сэндисон и др., 2017). Длительный период полувыведения резафунгина позволяет применять еженедельный режим дозирования (Sandison et al., 2017; Софьян и др., 2018).

Резафунгин обладает мощной активностью in vitro против распространенных видов Candida и Aspergillus (Wiederhold et al. , 2018; Arendrup et al., 2018a,b). Кроме того, этот противогрибковый препарат обладает сильной противогрибковой активностью in vitro против потенциально полирезистентных видов C. auris (Berkow and Lockhart, 2018). Более того, in vivo эффективность резафунгина в моделях диссеминированного кандидоза у мышей с нейтропенией была продемонстрирована против C.albicans, C. glabrata, C. parapsilosis (Lepak et al., 2018) и C. auris (Hager et al., 2018a).

Тритерпеноиды

Класс тритерпеноидов представлен ибрексафунгерпом (SCY-078, ранее MK-3118), новым полусинтетическим производным полуацетального тритерпенового гликозида энфумафунгина (Synexis Inc., Джерси-Сити, штат Нью-Джерси, США) (Pfaller et al., 2017; Wring et al. и др., 2017; Дэвис и др., 2019). Это ингибитор β-D-глюкансинтазы с сходными, но не идентичными сайтами связывания с эхинокандинами в каталитических областях Fks1p и Fks2p фермента (Walker et al., 2011; Хименес-Ортигоса и др. , 2017). Он имеет высокое связывание с белками и хорошее проникновение в ткани, хотя, как и эхинокандины, плохо проникает в ЦНС (Davis et al., 2019). Фармакокинетическое преимущество этого нового противогрибкового средства заключается в его хорошей пероральной биодоступности (Walker et al., 2011).

Ibrexafungerp продемонстрировал хорошую активность in vitro в отношении соответствующих грибковых патогенов, таких как Candida spp., включая мультирезистентный C. glabrata (Pfaller et al., 2013, 2017; Jiménez-Ortigosa et al., 2017), штаммы-продуценты биопленки (Marcos-Zambrano et al., 2017b) и C. auris (Larkin et al., 2017). Примечательно, что устойчивые к эхинокандину штаммы Candida , несущие мутации горячей точки в Fksp, могут сохранять чувствительность к ибрексафунгерпу (Pfaller et al., 2017). Более глубокое исследование, анализирующее штаммов C. glabrata с резистентностью к эхинокандину и чувствительностью к ибрексафунгерпу, показало, что ибрексафунгерп имеет лишь частичное перекрытие в сайтах связывания эхинокандинов Fksp в ферменте β-D-глюкансинтазы (Jiménez-Ortigosa et al. , 2017). В отношении клинически значимых видов Aspergillus ибрексафунгерп также продемонстрировал мощную активность in vitro (Davis et al., 2019). Кроме того, комбинация ибрексафунгерпа с вориконазолом или амфотерицином В продемонстрировала синергизм против штаммов A. fumigatus дикого типа (Ghannoum et al., 2018). Следует отметить, что ибрексафунгерп проявлял некоторую противогрибковую активность в отношении полирезистентной плесени Lomentospora prolificans (Lamoth and Alexander, 2015) и высокоактивен в отношении Paecilomyces variotii (Lamoth and Alexander, 2015).Однако ибрексафунгерп малоактивен в отношении Mucorales spp., Fusarium spp. и Purpureocillium lilacinum (Lamoth and Alexander, 2015). Активность ибрексафунгерпа in vitro представлена ​​в таблице 1.

Таблица 1 . In vitro активность антагонистов основной клеточной стенки.

В экспериментах по определению времени до уничтожения ибрексафунгерп продемонстрировал в основном фунгицидную активность в отношении изолятов Candida albicans и non-albicans (Scorneaux et al. , 2017). Для in vivo мышиных моделей инвазивного кандидоза, вызванного C. albicans , C. glabrata и C. parapsilosis , этот препарат показал сходное зависимое от концентрации уничтожение трех видов Candida (Lepak et al., 2015).

Этот противогрибковый препарат в настоящее время проходит клинические испытания для лечения вульвовагинального кандидоза (фаза 3; https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03987620), инвазивного аспергиллеза в комбинации с вориконазолом (фаза 2; https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03672292), инвазивный кандидоз и кандидоз слизистых оболочек (фаза 3; https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03059992), а также инвазивный кандидоз, вызванный C. auris (фаза 3; https:/ /clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03363841).

Ингибиторы хитинсинтазы

Хитин является важным компонентом клеточной стенки грибов, и соединения, влияющие на его синтез, были исследованы в качестве противогрибковых средств, таких как никкомицины, полиоксины и плагиохин (Chaudhary et al. , 2013).

Никкомицины представляют собой пептидилнуклеозидные агенты, которые конкурентно ингибируют хитинсинтазу ( CHS ). Никкомицин Z имеет активность in vitro против C. parapsilosis, Coccidioides immitis и Blastomyces dermatitidis (Hector et al., 1990), но его полезность зависит от синергизма с эхинокандинами для C. albicans, A. fumigatus, и C. immitis (Chiou et al., 2001; Cheung and Hui, 2017). Одно исследование с использованием мышиной модели инвазивного кандидоза показало, что никкомицин Z плюс эхинокандины были эффективны для лечения инфекций, вызванных резистентным к эхинокандину штаммом C.albicans (Cheung and Hui, 2017).

Ингибиторы гликозилфосфатидил-инозитолового якоря

Гликозилфосфатидилинозитол (GPI) является компонентом клеточной стенки эукариот и синтезируется в эндоплазматическом ретикулуме консервативным путем (Ikezawa, 2002). Гликолипиды GPI прикрепляют различные белки к клеточной стенке и необходимы для ее целостности (Yadav and Khan, 2018).

Противогрибковые препараты, воздействующие на путь синтеза якоря GPI, были разработаны за последние 15 лет (Tsukahara et al., 2003; Мутц и Ремер, 2016). Одной из мишеней пути синтеза якоря GPI является белок Gwt1 (GPI-заякоренный белок переноса 1), инозитол-ацилтрансфераза, которая катализирует ацилирование инозитола (Tsukahara et al., 2003; Hata et al., 2011). Ингибирование Gwt1 нарушает целостность клеточной стенки, продукцию биопленки, образование зародышевой трубки и вызывает серьезные дефекты роста грибов (Yadav and Khan, 2018). Было показано, что у C. albicans и Saccharomyces cerevisiae ингибирование Gwt1 ставит под угрозу созревание и стабилизацию GPI-заякоренных маннопротеинов (McLellan et al., 2012). Первым соединением, использованным для ингибирования фермента Gwt1, была молекула 1-(4-бутилбензил)изохинолина (BIQ), описанная Tsukahara et al. (2003).

Исследовательскими лабораториями Tsukuba компании Eisai Co., Ltd. (Ибараки, Япония) из молекулы BIQ было создано новое соединение с более высокой противогрибковой активностью, APX001A или manogepix (ранее E1210) (Hata et al. , 2011). Позже компания Amplix Pharmaceuticals Inc. (Сан-Диего, Калифорния, США) разработала N-фосфонооксиметилпролекарство фосманогепикс (APX001, ранее E1211) для перорального и внутривенного введения.Пролекарство метаболизируется фосфатазами и превращается в маногепикс (APX001A, ранее E1210), который ингибирует Gwt1, но не человеческий гомолог Pig-W (Watanabe et al., 2012; Wiederhold et al., 2019). Пероральная форма фосманогепикса показала хорошую биодоступность в экспериментах на мышах (Zhao et al., 2018).

Активность in vitro маногепикса исследовалась в отношении дрожжей и плесени (Miyazaki et al., 2011; Castanheira et al., 2012). Низкие минимальные ингибирующие концентрации (МИК) этого нового противогрибкового средства были обнаружены в отношении C.albicans, C. tropicalis, C. glabrata, C. parapsilosis, C. lusitaniae, C. kefyr, (Miyazaki et al., 2011; Pfaller et al., 2019), а также против полирезистентного C. auris (Hager et al., 2018a) и устойчивый к эхинокандину C. glabrata (Pfaller et al., 2019). Однако результаты in vitro по сравнению с C. krusei и C. norvegensis были описаны как плохие (Arendrup et al., 2018a). Сильная активность in vitro маногепикса также была отмечена против штаммов Cryptococcus neoformans и Cryptococcus gattii (Shaw et al., 2018; Пфаллер и др., 2019). Относительно активности in vitro в отношении плесени, низкие МИК в отношении видов Aspergillus из секции Fumigati, Flavi, Terrei и Nigri (Miyazaki et al., 2011; Pfaller et al., 2019), Purpureocillium lilacinum, Cladosporium видов , Phialophora видов, Rhinocladiella aquaspersa, Fonsecaea pedrosoi (Miyazaki et al., 2011), Scedosporium apiospermum и Scedosporium aurantiacum (Castanheira et al., 2012), а также против видов с множественной лекарственной устойчивостью Fusarium solani и L. prolificans (Castanheira et al., 2012). Активность in vitro маногепикса представлена ​​в таблице 1.

Активность in vivo маногепикса/фосманогепикса была также исследована на мышиных моделях диссеминированного кандидоза, аспергиллеза, фузариоза (Hata et al., 2011; Hager et al., 2018b) и пневмонии Coccidioides immitis (Viriyakosol et др., 2019). В мышиной модели диссеминированной инфекции C. albicans он показал эффективность, аналогичную каспофунгину, флуконазолу и липосомальному амфотерицину B (Hata et al., 2011). В другом исследовании сравнивалась эффективность маногепикса/фосманогепикса и анидулафунгина для лечения мышей с диссеминированной инфекцией C. auris и были обнаружены более высокие показатели выживаемости в группе, получавшей ингибитор Gwt1 (Hager et al., 2018b). В мышиной модели инвазивной инфекции Aspergillus flavus мыши, получавшие этот новый противогрибковый препарат, имели аналогичные показатели выживаемости по сравнению с группами, получавшими либо вориконазол, либо каспофунгин (Hata et al., 2011). В том же исследовании мыши, инфицированные F. solani , показали более высокую выживаемость при лечении фосманогепиксом в дозе 20 мг/кг по сравнению с контрольной группой без противогрибковой терапии (Hata et al., 2011).

В настоящее время проводится фаза 2 открытого исследования фосманогепикс для лечения кандидемии первой линии.

Модификации клеточной стенки грибов и резистентность к противогрибковым препаратам

Изменения в строении клеточных стенок грибов появляются после стрессов, вызванных микроокружением хозяина и противогрибковым воздействием (Ene et al., 2012; Перлин, 2015; Меса-Аранго и др., 2016).

Исследования in vitro показали, что в условиях, имитирующих микроокружение хозяина в очаге инфекции, у дрожжевых клеток могут развиться модификации стенок и устойчивость к противогрибковым препаратам (Ene et al., 2012; Brown et al., 2014). Клетки C. albicans , выращенные в сыворотке (<0,1% глюкозы), обнаруживают серьезные изменения в архитектуре клеточной стенки с уменьшением длины маннановых цепей, а также содержания хитина и β-глюкана (Ene et al. , 2012). Более того, мешающие росту условия с альтернативными источниками углерода, такими как лактат, изменяют биосинтез клеточной стенки, что приводит к образованию более тонкой, но более жесткой внутренней клеточной стенки (Ene et al., 2012). Эти реконструированные клеточные стенки клеток C. albicans становятся устойчивыми к амфотерицину B (AMB) и каспофунгину (Ene et al., 2012). Сходные результаты были продемонстрированы для штаммов C. glabrata , которые росли в альтернативной углеродной микросреде, обнаруживая измененную архитектуру клеточной стенки с более низким содержанием хитина и β-глюкана и с увеличенным наружным слоем маннана (Chew et al., 2019). Эти клетки C. glabrata также были устойчивы к АТ-В при выращивании в лактате или олеате (Chew et al., 2019).

Промежуточным этапом устойчивости к противогрибковым препаратам является развитие толерантности (Perlin, 2015). Клетки, пережившие воздействие лекарств, могут реагировать на отбор и развивать устойчивость (Perlin, 2015). Воздействие эхинокандина вызывает стресс клеточной стенки за счет ингибирования синтеза β-D-глюкана, который запускает адаптивные клеточные факторы, стимулирующие выработку хитина (Walker et al., 2008, 2010). Протеинкиназа C (PKC), высокоосмолярный глицериновый ответ (HOG) и пути Ca +2 -кальциневрина участвуют в ответе на повреждение клеточной стенки и синтезе хитина (рис. 1B; Lagorce et al., 2003; Bermejo et al.). al., 2008; Walker et al., 2008; Fortwendel et al., 2009). Шаперон Hsp90 является еще одним важным компонентом толерантности к эхинокандинам после стресса клеточной стенки (Singh et al., 2009; O’Meara et al., 2017). Кальциневрин является клиентским белком для шаперона Hsp90, и генетический компромисс гена HSP90 снижает механизм толерантности у C.albicans (Singh et al., 2009), C. glabrata (Singh-Babak et al., 2012) и Aspergillus fumigatus (Lamoth et al., 2014). Другое выражение грибковых адаптационных механизмов, вызванных противогрибковым стрессом, называется пародоксальным эффектом, который представляет собой восстановление роста грибов после воздействия противогрибковых препаратов в возрастающих концентрациях выше определенного порога (Aruanno et al. , 2019). Об этом явлении сообщалось в Candida spp. и Aspergillus spp.после воздействия эхинокандинов, преимущественно каспофунгина (Rueda et al., 2014; Marcos-Zambrano et al., 2017a; Aruanno et al., 2019). Подобно механизму толерантности, парадоксальный эффект связан с внутриклеточными сигнальными путями, которые приводят к ремоделированию клеточной стенки с увеличением количества хитина и потерей содержания β-D-глюкана (Aruanno et al., 2019). У A. fumigatus воздействие каспофунгина может также привести к увеличению продукции активных форм кислорода (АФК) и к модификации липидного микроокружения, окружающего β-D-глюкансинтазу, что приводит к резистентности к эхинокандинам (Satish et al., 2019).

В C. albicans другие важные компоненты для толерантности к эхинокандину могут быть расположены на хромосоме 5 (Ch5), поскольку некоторые толерантные мутанты показали либо моносомию Ch5, либо комбинированную моносомию левого плеча и трисомию правого плеча Ch5 (Янг и др. , 2017). В конце концов, постоянное воздействие эхинокандина приводит к мутациям FKS , и появляются организмы с выраженной и стабильной устойчивостью с высоким содержанием хитина в клеточной стенке (Walker et al., 2013; Perlin, 2015).Мутации FKS у видов Candida и резистентность к эхинокандину широко изучались в других источниках (Walker et al., 2010; Perlin, 2015).

Резистентность к AMB может быть объяснена несколькими механизмами, среди которых модификации архитектуры клеточной стенки (Seo et al., 1999; Mesa-Arango et al., 2016). Изоляты Aspergillus flavus с резистентностью к AMB были связаны с инвазивными грибковыми инфекциями с плохим прогнозом у пациентов с нейтропенией (Koss et al., 2002; Хадрич и др., 2012). Seo, Akiyoshi и Ohnishi продемонстрировали, что in vitro устойчивые к АМВ мутантные штаммы A. flavus имеют одинаковое содержание стеролов в клеточной мембране по сравнению с чувствительными штаммами (Seo et al., 1999). Наоборот, клеточная стенка устойчивых мутантов содержала больше 1,3-β-D-глюкана по сравнению с чувствительными штаммами (Seo et al., 1999). Авторы предполагают, что более высокое содержание глюканов, обнаруженное у резистентных мутантов, помогает адсорбировать АМВ, что затрудняет проникновение противогрибкового препарата на клеточную мембрану (Seo et al., 1999). Сравнение биопленочных (АТВ-устойчивых) и планктонных (АТВ-чувствительных) клеток C. albicans показало, что клеточная стенка выращенных в биопленке изолятов толще и содержит больше β-1,3-глюканов (Nett et al., 2007). У C. tropicalis резистентность к АТВ была связана с несколькими потенциальными механизмами, такими как повышение активности каталазы, изменения митохондриального потенциала, низкое накопление активных форм кислорода и дефицит эргостерола на клеточной мембране (Forastiero et al., 2013; Меса-Аранго и др., 2014). Совсем недавно модификации клеточных стенок также были обнаружены у устойчивых к АТВ изолятов C. tropicalis (Mesa-Arango et al., 2016). Устойчивые к АМВ изоляты показали более толстые клеточные стенки и больший объем по сравнению с восприимчивыми изолятами (Mesa-Arango et al., 2016). Кроме того, у этих устойчивых к АМВ организмов в 2–3 раза повышен уровень β-1,3-глюканов в клеточной стенке (Mesa-Arango et al., 2016).

Выводы и перспективы

Недавние достижения в изучении клеточной стенки грибов открыли двери для новых терапевтических методов лечения грибковых инфекций и помогли лучше понять механизмы резистентности к противогрибковым препаратам.Новые противогрибковые препараты, нацеленные на клеточную стенку, демонстрируют лучшую безопасность и ФК/ФД-профили, чем доступные токсичные молекулы полиенов и производных азола. Новый ингибитор β-D-глюкансинтазы ибрексафунгерп обладает мощной активностью in vitro против полирезистентных патогенов, таких как резистентные к эхинокандину C. glabrata , C. auris, и виды Aspergillus .

Ингибиторы глюкансинтазы

, такие как никкомицин Z, обладают сильным синергизмом с эхинокандинами и могут быть полезны для лечения инфекций, устойчивых к эхинокандинам Candida , и рефрактерного аспергиллеза.

Ингибиторы якорного пути GPI APX001/APX001A имеют хорошие фармакокинетические профили и высокую активность in vitro в отношении нескольких патогенных видов грибов, включая полирезистентные C. auris, F. solani, и L. prolificans . Это делает эти препараты наиболее многообещающими противогрибковыми препаратами, которые будут запущены в производство в будущем.

Микроокружение в месте заражения приводит к модификации клеточной стенки грибка, что может привести к резистентности к противогрибковым препаратам.Стресс клеточной стенки, вызванный воздействием эхинокандина, приводит к появлению толерантных клеток с высоким содержанием хитина. Пути PKC, HOG и Ca +2 -кальциневрина, а также шаперон Hsp90 являются ключевыми компонентами феномена противогрибковой толерантности и должны быть изучены в качестве будущих мишеней для противогрибковой терапии. Несколько устойчивых к АМВ A. flavus и C. tropicalis показали более высокое содержание глюканов в клеточной стенке, но необходимы дальнейшие исследования, анализирующие модификации клеточной стенки и устойчивость к АМВ, чтобы усилить эту корреляцию.

Вклад авторов

SL, AC и JA задумали рукопись. SL и JA провели обзор литературы. SL, AC и JA написали рукопись. AC пересмотрел рукопись.

Финансирование

Работа SL поддерживается CAPES (Грант 88882.430766/2019-01). Работа JA поддерживается FAPESP (грант 2018/18347-4). AC получил гранты от CNPq (Грант 307510/2015-8) и FAPESP (Грант 2017/02203-7).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Сноски

Ссылки

Агилар-Сапата, Д., Петрайтене, Р., и Петрайтис, В. (2015). Эхинокандины: расширяющийся противогрибковый арсенал. клин. Заразить. Дис. 61 (Прил. 6), S604–S611. doi: 10.1093/cid/civ814

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Арендруп, М. К., Чоудхари, А., Аствад, К. М. Т., и Йоргенсен, К. М. (2018a). Активность APX001A in vitro в отношении современных изолятов крови и Candida auris определена эталонным методом EUCAST. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62, номер: e01225-18. doi: 10.1128/AAC.01225-18

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Arendrup, M.C., Meletiadis, J., Zaragoza, O., Jørgensen, K.M., Marcos-Zambrano, L.J., Kanioura, L., et al. (2018б). Многоцентровое определение чувствительности видов Candida к резафунгину (CD101) методом EUCAST. клин. микробиол. Заразить. 24, 12:00–12:04. doi: 10.1016/j.cmi.2018.02.021

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Аруанно, М., Глампедакис, Э., и Ламот, Ф. (2019). Эхинокандины для лечения инвазивного аспергиллеза: от лаборатории к постели. Антимикроб. Агенты Чемотер. 63, фото: e00399-19. doi: 10.1128/AAC.00399-19

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Беркоу, Э. Л., и Локхарт, С. Р. (2018). Активность CD101, эхинокандина длительного действия, против клинических изолятов Candida auris. Диагн. микробиол. Заразить. Дис. 90, 196–197. дои: 10.1016/j.diagmicrobio.2017.10.021

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Бермехо, К., Родригес, Э., Гарсия, Р., Родригес-Пенья, Х.М., Родригес де ла Консепсьон, М.Л., Ривас, К., и др. (2008). Последовательная активация путей дрожжей HOG и SLT2 необходима для выживания клеток в условиях стресса клеточной стенки. Мол. биол. Мобильный 19, 1113–1124. doi: 10.1091/mbc.e07-08-0742

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Боуман, Дж.C., Hicks, P.S., Kurtz, M.B., Rosen, H., Schmatz, D.M., Liberator, P.A., et al. (2002). Противогрибковый эхинокандин ацетат каспофунгина убивает растущие клетки Aspergillus fumigatus in vitro. Антимикроб. Агенты Чемотер. 46, 3001–3012. doi: 10.1128/AAC.46.9.3001-3012.2002

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Браун, А.Дж.П., Бадж, С., Калорити, Д. , Тиллманн, А., Якобсен, М.Д., Инь, З., и др. (2014). Адаптация к стрессу у патогенного гриба. Дж. Экспл. биол. 217, 144–155. doi: 10.1242/jeb.088930

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Castanheira, M., Duncanson, F.P., Diekema, D.J., Guarro, J., Jones, R.N., and Pfaller, M.A. (2012). Активность E1210 и агентов сравнения тестировали методами микроразведения бульона CLSI и EUCAST в отношении видов Fusarium и Scedosporium , идентифицированных с помощью молекулярных методов. Антимикроб. Агенты Чемотер. 56, 352–357. дои: 10.1128/ААС.05414-11

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Чунг, Ю.-Ю., и Хуэй, М. (2017). Эффекты эхинокандинов в сочетании с никкомицином Z против инвазивных изолятов Candida albicans из кровотока и мутантов fks. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, фото: e00619-17. doi: 10.1128/AAC.00619-17

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чу, С. Ю., Хо, К.Л., Чеа, Ю.К., Сандай, Д., Браун, А.Дж.П. и Тан, LTL (2019). Физиологически значимые альтернативные источники углерода модулируют образование биопленки, архитектуру клеточной стенки, а также устойчивость к стрессу и противогрибковым препаратам Candida glabrata . Междунар. Дж. Мол. науч. 20, номер: E3172. дои: 10.3390/ijms20133172

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Chiou, C.C., Mavrogiorgos, N., Tillem, E., Hector, R., and Walsh, T.J. (2001). Синергия, фармакодинамика и ультраструктурные изменения во времени взаимодействия между никкомицином Z и эхинокандином FK463 против Aspergillus fumigatus . Антимикроб. Агенты Чемотер. 45, 3310–3321. doi: 10.1128/AAC.45.12.3310-3321.2001

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Cordeiro, R.A., Brilhante, R.S.N., Rocha, M.F.G., Fechine, M.A.B., Costa, A.K.F., Camargo, Z.P., et al. (2006). In vitro активность каспофунгина, амфотерицина В и азолов против штаммов Coccidioides posadasii с северо-востока Бразилии. Микопатология 161, 21–26. doi: 10.1007/s11046-005-0177-0

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Эне И.V., Adya, A.K., Wehmeier, S., Brand, A.C., MacCallum, D.M., Gow, N.A.R., et al. (2012). Источники углерода-хозяина модулируют архитектуру клеточной стенки, лекарственную устойчивость и вирулентность грибкового патогена. Сотовый. микробиол. 14, 1319–1335. doi: 10.1111/j.1462-5822.2012.01813.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Эшпинель-Ингрофф, А. (2003). Противогрибковая активность анидулафунгина и микафунгина, лицензированных препаратов и исследуемого триазола позаконазола in vitro, определенная методами NCCLS для 12 052 грибковых изолятов: обзор литературы. Ред. Ибероам. Микол. 20, 121–136.

Реферат PubMed | Академия Google

Форастьеро, А., Меса-Аранго, А.С., Аластруй-Искьердо, А., Алькасар-Фуоли, Л., Берналь-Мартинес, Л., Пелаес, Т., и др. (2013). Перекрестная противогрибковая устойчивость Candida tropicalis связана с различными модификациями азоловой мишени (Erg11p). Антимикроб. Агенты Чемотер. 57, 4769–4781. doi: 10.1128/AAC.00477-13

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фортвендель, Дж.R., Juvvadi, P.R., Pinchai, N., Perfect, B.Z., Alpaugh, J.A., Perfect, J.R., et al. (2009). Дифференциальные эффекты ингибирования синтеза хитина и 1,3-{бета}-D-глюкана у мутантов ras и кальцинейрина Aspergillus fumigatus . Антимикроб. Агенты Чемотер. 53, 476–482. doi: 10.1128/AAC.01154-08

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ганнум М., Лонг Л., Ларкин Э. Л., Ишам Н., Шериф Р., Боррото-Эсода К. и др. (2018).Оценка противогрибковой активности нового перорального ингибитора глюкансинтазы SCY-078, по отдельности и в комбинации, для лечения инвазивного аспергиллеза. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62, e00244–e00218. doi: 10.1128/AAC.00244-18.

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Goldberg, J., Connolly, P., Schnizlein-Bick, C., Durkin, M., Kohler, S., Smedema, M., et al. (2000). Сравнение никкомицина Z с амфотерицином В и итраконазолом для лечения гистоплазмоза на мышиной модели. Антимикроб. Агенты Чемотер. 44, 1624–1629. doi: 10.1128/AAC.44.6.1624-1629.2000

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хадрих И., Макни Ф., Неджи С., Шейхрухоу Ф., Беллаадж Х., Эллуми М. и др. (2012). Резистентность к амфотерицину В in vitro связана с фатальной инфекцией Aspergillus flavus . Мед. Микол. 50, 829–834. дои: 10.3109/13693786.2012.684154

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хейдж, К.А., Коннолли П., Хоран Д., Дуркин М., Смедема М., Зарновский Р. и соавт. (2011). Исследование эффективности микафунгина при лечении гистоплазмоза с использованием двух североамериканских штаммов Histoplasma capsulatum . Антимикроб. Агенты Чемотер. 55, 4447–4450. doi: 10.1128/AAC.01681-10

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хагер, К.Л., Ларкин, Э.Л., Лонг, Л.А., и Ганнум, Массачусетс (2018a). Оценка эффективности резафунгина, нового эхинокандина, при лечении диссеминированной инфекции Candida auris с использованием модели мыши с ослабленным иммунитетом. J. Антимикроб. Чемотер. 73, 2085–2088. doi: 10.1093/jac/dky153

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Хагер, К.Л., Ларкин, Э.Л., Лонг, Л., Зохра Абиди, Ф., Шоу, К.Дж., и Ганнум, М.А. (2018b). In vitro и in vivo оценка противогрибковой активности APX001A/APX001 в отношении Candida auris. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62, номер: e02319-17. doi: 10.1128/AAC.02319-17

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Хасим, С.и Коулман, Дж. Дж. (2019). Ориентация на клеточную стенку грибка: современные методы лечения и последствия для разработки альтернативных противогрибковых средств. Будущее Мед. хим. 11, 869–883. doi: 10.4155/fmc-2018-0465

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Хата К., Хории Т., Миядзаки М., Ватанабэ Н.-А., Окубо М., Сонода Дж. и др. (2011). Эффективность перорального препарата Е1210, нового противогрибкового препарата широкого спектра действия с новым механизмом действия, на мышиных моделях кандидоза, аспергиллеза и фузариоза. Антимикроб. Агенты Чемотер. 55, 4543–4551. doi: 10.1128/AAC.00366-11

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Гектор, Р.Ф., Циммер, Б.Л., и Паппагианис, Д. (1990). Оценка никкомицинов X и Z в мышиных моделях кокцидиоидомикоза, гистоплазмоза и бластомикоза. Антимикроб. Агенты Чемотер. 34, 587–593. doi: 10.1128/AAC.34.4.587

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хобсон, Р.P., Munro, C.A., Bates, S., MacCallum, D.M., Cutler, J.E., Heinsbroek, S.E.M., et al. (2004). Потеря маннозилфосфата клеточной стенки у Candida albicans не влияет на распознавание макрофагами. Дж. Биол. хим. 279, 39628–39635. doi: 10.1074/jbc.M405003200

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хименес-Ортигоса, К., Перес, В. Б., Ангуло, Д., Боррото-Эсода, К., и Перлин, Д. С. (2017). Приобретение De novo устойчивости к SCY-078 у Candida glabrata включает мутации FKS, которые перекрываются и отличаются от мутаций, придающих устойчивость к эхинокандину. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, e00833–e00817. doi: 10.1128/AAC.00833-17

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Джонсон, доктор медицины, и Перфект, младший (2003). Каспофунгин: первый одобренный агент нового класса противогрибковых препаратов. Эксперт. мнение Фармацевт. 4, 807–823. дои: 10.1517/14656566.4.5.807

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Кофла, Г., и Рунке, М. (2011). Фармакология и метаболизм анидулафунгина, каспофунгина и микафунгина при лечении инвазивного кандидоза — обзор литературы. евро. Дж. Мед. Рез. 16, 159–166. дои: 10.1186/2047-783X-16-4-159

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Косс Т., Багери Б., Зеана К., Романьоли М. Ф. и Гроссман М. Э. (2002). Амфотерицин B-резистентная инфекция Aspergillus flavus успешно лечится каспофунгином, новым противогрибковым средством. Дж. Ам. акад. Дерматол. 46, 945–947. doi: 10.1067/mjd.2002.120627

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Лагорс, А., Hauser, N.C., Labourdette, D., Rodriguez, C., Martin-Yken, H., Arroyo, J., et al. (2003). Полногеномный анализ реакции на мутации клеточной стенки у дрожжей Saccharomyces cerevisiae . Дж. Биол. хим. 278, 20345–20357. doi: 10.1074/jbc.M211604200

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ламот, Ф., и Александр, Б.Д. (2015). Противогрибковая активность SCY-078 (MK-3118) и стандартных противогрибковых средств в отношении клинических изолятов плесени, не относящихся к Aspergillus. Антимикроб. Агенты Чемотер. 59, 4308–4311. doi: 10.1128/AAC.00234-15

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ламот Ф., Юввади П. Р., Герке К., Асфау Ю. Г. и Штайнбах В. Дж. (2014). Транскрипционная активация белка теплового шока 90, опосредованная проксимальной промоторной областью, как триггер устойчивости к каспофунгину у Aspergillus fumigatus . Дж. Заражение. Дис. 209, 473–481. doi: 10.1093/infdis/jit530

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ларкин, Э., Hager, C., Chandra, J., Mukherjee, P.K., Retuerto, M., Salem, I., et al. (2017). Возникающий патоген Candida auris: фенотип роста, факторы вирулентности, активность противогрибковых препаратов и влияние SCY-078, нового ингибитора синтеза глюкана, на морфологию роста и образование биопленки. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, номер: e02396-16. doi: 10.1128/AAC.02396-16

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лепак, А. Дж., Марчилло, К., и Андес, Д.Р. (2015). Фармакодинамическая целевая оценка нового перорального ингибитора глюкансинтазы, SCY-078 (MK-3118), с использованием мышиной модели инвазивного кандидоза in vivo. Антимикроб. Агенты Чемотер. 59, 1265–1272. doi: 10.1128/AAC.04445-14

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Лепак, А. Дж., Чжао, М., ВанСкой, Б., Амброуз, П. Г., и Андес, Д. Р. (2018). Фармакодинамика эхинокандина длительного действия, CD101, в мышиной модели нейтропенического инвазивного кандидоза с использованием схемы дозирования с увеличенным интервалом. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62, номер: e01572-18. doi: 10.1128/AAC.01572-18

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ли, Р.К., и Ринальди, М.Г. (1999). Противогрибковая активность никкомицина Z in vitro в сочетании с флуконазолом или итраконазолом. Антимикроб. Агенты Чемотер. 43, 1401–1405. doi: 10.1128/AAC.43. 6.1401

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Маркос-Замбрано, Л. Дж., Эскрибано, П., Санчес-Каррильо, К., Буза, Э., и Гвинея, Дж. (2017a). Частота парадоксального эффекта, измеренная с использованием методики EUCAST с микафунгином, анидулафунгином и каспофунгином в отношении изолятов видов Candida, вызывающих кандидемию. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, фото: e01584-16. doi: 10.1128/AAC.01584-16

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Маркос-Самбрано, Л. Дж., Гомес-Перосанс, М., Эскрибано, П., Боуза, Э., и Гвинея, Дж. (2017b). Новый пероральный ингибитор глюкансинтазы SCY-078 проявляет активность in vitro в отношении сидячих и планктонных Candida spp. J. Антимикроб. Чемотер. 72, 1969–1976 гг. doi: 10.1093/jac/dkx010

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Мазур П. и Багинский В. (1996). Для активности 1,3-β-D-глюкансинтазы in vitro необходим GTP-связывающий белок Rho1. Дж. Биол. хим. 271, 14604–14609. doi: 10.1074/jbc.271.24.14604

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Маклеллан, К. А., Уайтселл, Л., Кинг, О. Д., Ланкастер, А. К., Мазичек, Р.и Линдквист, С. (2012). Ингибирование биосинтеза якоря GPI в ​​грибах вызывает стресс эндоплазматического ретикулума и повышает иммуногенность. ACS Хим. биол. 7, 15:20–15:28. дои: 10.1021/cb300235m

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Меса-Аранго, А.С., Руэда, К., Роман, Э., Квинтин, Дж., Террон, М.С., Луке, Д., и др. (2016). Изменения клеточной стенки у устойчивых к амфотерицину В штаммов Candida tropicalis и связь с иммунными реакциями, вызванными хозяином. Антимикроб. Агенты Чемотер. 60, 2326–2335. doi: 10.1128/AAC.02681-15

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Меса-Аранго, А. К., Тревихано-Контадор, Н., Роман, Э., Санчес-Фреснеда, Р. , Касас, К., Эрреро, Э., и др. (2014). Продукция активных форм кислорода является универсальным механизмом действия амфотерицина В против патогенных дрожжей и способствует фунгицидному действию этого препарата. Антимикроб. Агенты Чемотер. 58, 6627–6638.doi: 10.1128/AAC.03570-14

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Миядзаки М., Хории Т., Хата К., Ватанабэ Н.-А., Накамото К., Танака К. и др. (2011). Активность нового противогрибкового препарата Е1210 in vitro в отношении клинически важных дрожжевых и плесневых грибов. Антимикроб. Агенты Чемотер. 55, 4652–4658. doi: 10.1128/AAC.00291-11

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Мора-Дуарте, Дж., Беттс, Р., Ротштейн, К., Colombo, A.L., Thompson-Moya, L., Smietana, J., et al. (2002). Сравнение каспофунгина и амфотерицина В при инвазивном кандидозе. Н. англ. Дж. Мед. 347, 2020–2029 гг. дои: 10.1056/NEJMoa021585

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Манро, Калифорния (2013). Хитин и глюкан, инь и ян клеточной стенки грибов, значение для открытия противогрибковых препаратов и терапии. Доп. заявл. микробиол. 83, 145–172. doi: 10.1016/B978-0-12-407678-5.00004-0

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Накаи Т., Уно Дж., Икеда Ф., Тавара С., Нисимура К. и Мияджи М. (2003). Противогрибковая активность микафунгина (ФК463) in vitro в отношении диморфных грибов: сравнение дрожжеподобных и мицелиальных форм. Антимикроб. Агенты Чемотер. 47, 1376–1381. doi: 10.1128/AAC.47.4.1376-1381.2003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Нетт Дж., Линкольн Л., Марчилло К., Мэсси Р., Holoyda, K., Hoff, B., et al. (2007). Предполагаемая роль бета-1,3 глюканов в устойчивости биопленки Candida albicans . Антимикроб. Агенты Чемотер. 51, 510–520. doi: 10.1128/AAC.01056-06

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Найфелер, Р. , и Келлер-Ширляйн, В. (1974). Метаболиты микроорганизмов. 143. Эхинокандин В, новый полипептид-антибиотик из Aspergillus nidulans var. echinulatus: выделение и структурные компоненты. Хелв. Чим. Acta 57, 2459–2477. doi: 10.1002/hlca.19740570818

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

О’Мира, Т. Р., Роббинс, Н., и Коуэн, Л. Э. (2017). Сеть шаперонов Hsp90 модулирует признаки вирулентности Candida. Тенденции микробиол. 25, 809–819. doi: 10.1016/j.tim.2017.05.003

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Паппас, П. Г., Кауфман, К. А., Андес, Д. Р., Клэнси, С. Дж., Марр, К.А., Остроски-Цейхнер Л. и соавт. (2016). Клиническое практическое руководство по лечению кандидоза: обновление 2016 г., подготовленное Американским обществом инфекционистов. клин. Заразить. Дис. 62, е1–е50. doi: 10.1093/cid/civ933

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Перлин, Д. С. (2015). Резистентность к эхинокандину у Candida. клин. Заразить. Дис. 61 (Приложение 6), S612–S617. doi: 10.1093/cid/civ791

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Пфаллер, М.А., Хабанд, М. Д., Фламм, Р. К., Бьен, П. А., и Кастанейра, М. (2019). In vitro Активность APX001A (Manogepix) и препаратов сравнения в отношении 1706 изолятов грибов, собранных в ходе международной программы наблюдения (2017 г.). Антимикроб. Агенты Чемотер. 63, фото: e00840-19. doi: 10.1128/AAC.00840-19

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Пфаллер, М. А., Мессер, С. А., Мотыль, М. Р., Джонс, Р. Н., и Кастанхейра, М. (2013).In vitro активность нового перорального ингибитора глюкансинтазы (MK-3118), протестированная против Aspergillus spp. методами микроразведения бульона CLSI и EUCAST. Антимикроб. Агенты Чемотер. 57, 1065–1068. doi: 10.1128/AAC.01588-12

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Пфаллер, М. А., Мессер, С. А., Ромберг, П. Р., Боррото-Эсода, К., и Кастанейра, М. (2017). Дифференциальная активность перорального ингибитора глюкансинтазы SCY-078 в отношении дикого типа и резистентных к эхинокандину штаммов видов Candida. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, e00161–e00117. doi: 10.1128/AAC.00161-17

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Кадота Х., Питон С.П., Иноуэ С.Б., Арисава М., Анраку Ю., Чжэн Ю. и др. (1996). Идентификация дрожжевой Rho1p GTPase как регуляторной субъединицы 1,3-β-глюкансинтазы. Наука 272, 279–281. doi: 10.1126/наука.272.5259.279

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Руэда, К., Куэнка-Эстрелла, М.и Сарагоса, О. (2014). Парадоксальный рост Candida albicans в присутствии каспофунгина связан с множественными перестройками клеточной стенки и снижением вирулентности. Антимикроб. Агенты Чемотер. 58, 1071–1083. doi: 10.1128/AAC.00946-13

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рюпинг, М. Дж., Верешильд, Дж. Дж., Фаровски, Ф., и Корнели, О. А. (2008). Анидулафунгин: преимущество для новичка? Эксперт. Преподобный Клин.Фармакол. 1, 207–216. дои: 10.1586/17512433.1.2.207

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Сэндисон, Т., Онг, В., Ли, Дж., и Тай, Д. (2017). Безопасность и фармакокинетика CD101 IV, нового эхинокандина, у здоровых взрослых. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, e01627–e01616. doi: 10.1128/AAC.01627-16

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Сатиш С., Хименес-Ортигоса С., Чжао Ю., Ли М. Х., Долгов Э., Крюгер Т. и др.(2019). Стресс-индуцированные изменения в липидном микроокружении β-(1,3)-D-глюкансинтазы вызывают клинически важную резистентность к эхинокандину у Aspergillus fumigatus. мБио 10:e00779-19. doi: 10.1128/mBio.00779-19

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шимолер-О’Рурк, Р., Рено, С., Мо, В., и Селитренникофф, К. П. (2003). Белок Neurospora crassa FKS связывается с субстратом (1,3) бета-глюкансинтазы, UDP-глюкозой. Курс. микробиол. 46, 408–412. doi: 10.1007/s00284-002-3884-5

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Скорно Б., Ангуло Д., Боррото-Эсода К., Ганнум М., Пил М. и Ринг С. (2017). SCY-078 является фунгицидным против видов Candida в исследованиях времени уничтожения. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, номер: e01961-16. doi: 10.1128/AAC.01961-16

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Сео, К., Акиёси, Х., и Ониши, Ю.(1999). Изменение состава клеточной стенки приводит к резистентности к амфотерицину В у Aspergillus flavus . Микробиолог. Иммунол. 43, 1017–1025. doi: 10.1111/j.1348-0421.1999.tb01231.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Shaw, K.J., Schell, W.A., Covel, J., Duboc, G., Giamberardino, C., Kapoor, M., et al. (2018). In vitro и in vitro оценка APX001A/APX001 и других ингибиторов Gwt1 против Cryptococcus. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62:e00523-18. doi: 10.1128/AAC.00523-18

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Шибата Н., Икута К., Имаи Т., Сато Ю., Сато Р., Сузуки А. и др. (1995). Наличие разветвленных боковых цепей в маннане клеточной стенки патогенных дрожжей Candida albicans . Взаимосвязь структура-антигенность между маннанами клеточной стенки Candida albicans и Candida parapsilosis . Дж. Биол. хим. 270, 1113–1122. дои: 10.1074/jbc.270.3.1113

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Сингх, С.Д., Роббинс, Н., Заас, А.К., Шелл, В.А., Перфект, Дж.Р., и Коуэн, Л.Е. (2009). Hsp90 регулирует резистентность к эхинокандину у патогенных дрожжей Candida albicans посредством кальциневрина. PLoS Pathog. 5:e1000532. doi: 10.1371/journal.ppat.1000532

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Сингх-Бабак, С. Д., Бабак, Т., Дизманн, С., Hill, J.A., Xie, J.L., Chen, Y.-L., et al. (2012). Глобальный анализ эволюции и механизма устойчивости к эхинокандину у Candida glabrata . PLoS Pathog. 8:e1002718. doi: 10.1371/journal.ppat.1002718

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Софьян А.К., Митчелл А., Шах Д.Н., Нгуен Т., Сим М., Тройчак А. и др. (2018). Резафунгин (CD101), эхинокандин нового поколения: систематический обзор литературы и оценка возможного места в терапии. Дж. Глоб. Антимикроб. Сопротивляться. 14, 58–64. doi: 10.1016/j.jgar.2018.02.013

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Стивенс, Д. А. (2000). Исследования лекарственного взаимодействия ингибитора глюкансинтазы (LY 303366) и ингибитора хитинсинтазы (никкомицин Z) для ингибирования и уничтожения грибковых патогенов. Антимикроб. Агенты Чемотер. 44, 2547–2548. doi: 10.1128/AAC.44.9.2547-2548.2000

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Томпсон, Г. Р., Баркер Б.М. и Видерхольд Н.П. (2017). Крупномасштабная оценка активности амфотерицина В, триазола и эхинокандина in vitro против видов Coccidioides из США. Учреждения. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, e02634–e02616. doi: 10.1128/AAC.02634-16

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Цукахара К., Хата К., Накамото К., Сагане К., Ватанабэ Н.-А., Куромицу Дж. и др. (2003). Подход медицинской генетики к идентификации молекулярной мишени нового ингибитора сборки клеточной стенки грибов. Мол. микробиол. 48, 1029–1042. doi: 10.1046/j.1365-2958.2003.03481.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Вириякосол, С., Капур, М., Окамото, С., Ковел, Дж., Солтоу, К. А., Трзосс, М., и соавт. (2019). APX001 и другие пролекарства ингибитора Gwt1 эффективны при экспериментальной пневмонии Coccidioides immitis . Антимикроб. Агенты Чемотер. 63, номер: e01715-18. doi: 10.1128/AAC.01715-18

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Уокер, Л. А., Гоу, Н.А.Р., и Манро, Калифорния (2013). Повышенное содержание хитина снижает восприимчивость видов Candida к каспофунгину. Антимикроб. Агенты Чемотер. 57, 146–154. doi: 10.1128/AAC.01486-12

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Уокер, Л. А., Манро, К. А., де Брюйн, И., Ленардон, доктор медицины, Маккиннон, А., и Гоу, Н. А. Р. (2008). Стимуляция синтеза хитина избавляет Candida albicans от эхинокандинов. PLoS Pathog. 4:e1000040.doi: 10.1371/journal.ppat.1000040

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Уокер, С. С., Сюй, Ю., Триантафиллоу, И., Уолдман, М. Ф., Мендрик, К., Браун, Н., и соавт. (2011). Открытие нового класса перорально активных противогрибковых ингибиторов β-1,3-d-глюкансинтазы. Антимикроб. Агенты Чемотер. 55, 5099–5106. doi: 10.1128/AAC.00432-11

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ватанабэ, Н.-А., Миядзаки, М. , Хории, Т., Сагане, К., Цукахара, К., и Хата, К. (2012). E1210, новый противогрибковый препарат широкого спектра действия, подавляет рост гиф Candida albicans за счет ингибирования биосинтеза гликозилфосфатидилинозитола. Антимикроб. Агенты Чемотер. 56, 960–971. doi: 10.1128/AAC.00731-11

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Видерхольд, Н.П., и Льюис, Р.Э. (2003). Эхинокандиновые противогрибковые препараты: обзор фармакологии, спектра действия и клинической эффективности. Экспертное заключение. расследование Наркотики 12, 1313–1333. дои: 10.1517/13543784.12.8.1313

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Видерхольд, Н. П., Локк, Дж. Б., Дарувала, П., и Бартизал, К. (2018). Резафунгин (CD101) демонстрирует сильную активность in vitro в отношении Aspergillus , включая устойчивые к азолам изоляты Aspergillus fumigatus и криптические виды. J. Антимикроб. Чемотер. 73, 3063–3067. doi: 10.1093/jac/dky280

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Видерхольд, Н.P., Najvar, L.K., Shaw, K.J., Jaramillo, R., Patterson, H., Olivo, M., et al. (2019). Эффективность отсроченной терапии с помощью Fosmanogepix (APX001) в мышиной модели инвазивного кандидоза Candida auris. Антимикроб. Агенты Чемотер. 63:e01120-19. doi: 10.1128/AAC.01120-19

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Wring, S.A., Randolph, R., Park, S., Abruzzo, G., Chen, Q., Flattery, A., et al. (2017). Доклиническая фармакокинетика и фармакодинамическая мишень SCY-078, первого в своем классе перорально активного противогрибкового ингибитора синтеза глюкана, на мышиных моделях диссеминированного кандидоза. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61:e02068-16. doi: 10.1128/AAC.02068-16

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ян Ф., Чжан Л., Вакабаяши Х. , Майерс Дж., Цзян Ю., Цао Ю. и др. (2017). Толерантность к каспофунгину у Candida albicans связана по крайней мере с тремя отличительными механизмами, которые регулируют экспрессию генов FKS и ремоделирование клеточной стенки. Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, e00071–e00017. дои: 10.1128/ААС.00071-17

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Чжао Ю., Ли М. Х., Падеру П., Ли А., Хименес-Ортигоса К., Парк С. и др. (2018). Значительно улучшенная фармакокинетика повышает эффективность APX001 in vivo против изолятов Candida с эхинокандином и множественной лекарственной устойчивостью в мышиной модели инвазивного кандидоза. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62, фото: e00425-18. doi: 10.1128/AAC.00425-18

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Открытие нового селективного фунгицида, воздействующего на клеточную стенку грибка для лечения дерматомикозов: 1,3-бис(3,4-дихлорфенокси)пропан-2-аминия хлорид


Задний план:

Грибковые инфекции широко распространены и являются причиной высоких показателей заболеваемости и смертности. В связи с этим поиск новых вариантов лечения весьма актуален.


Цели:

Проанализируйте химические соединения на наличие противогрибкового потенциала против грибков дерматомикоза.


Методы:

Противогрибковая активность 121 соединения, промежуточных соединений или производных 1,3-бис(арилокси)пропана, замещенного по С-2 (111 соединений), и производных изотиурония (10 соединений) была исследована с помощью тестов на чувствительность, механизма действия, токсичности и включения в гидрогель. .


Результаты:

Соединение 1,3-бис(3,4-дихлорфенокси)пропан-2-аминия хлорид (2j) оказалось наиболее активным фунгицидом в отношении дерматофитов и Candida spp. , в очень низких концентрациях (0,39-3,12 мкг/мл), в т.ч. на резистентные и полирезистентные клинические штаммы. Соединение 2j демонстрирует многообещающий профиль токсичности, показывая индекс селективности >10 по отношению к лимфоцитам человека.Соединение было классифицировано как не вызывающее раздражения по результатам теста HET-CAM и не вызывало гистопатологических изменений в коже ушей свиней, что представляет собой прекрасную перспективу для местного применения. 2j нацелен на клеточную стенку грибка, что было подтверждено сканирующей электронной микроскопией, которая также показала дополнительную способность 2j ингибировать образование псевдогиф Candida albicans и биопленки Microsporum canis. Соединение 2j было включено в гидрогель с биоадгезивным потенциалом. Результаты проникновения через кожу человека показали, что 2j значительно остается в эпидермисе, что идеально подходит для лечения дерматомикозов.


Выводы:

Таким образом, соединение 2j продемонстрировало потенциал для разработки противогрибкового лекарственного средства с выясненным механизмом действия и уже применялось в полутвердой форме в качестве нового терапевтического варианта при грибковых инфекциях кожи.


Ключевые слова:

1,3-бис(арилокси)пропан; Кандида виды.; лечение дерматомикозов; дерматофиты; фунгицид; гидрогель; изотиурония хлорид.

Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности. Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.


Настройка браузера на прием файлов cookie

Существует множество причин, по которым файл cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее распространенные причины:

  • В вашем браузере отключены файлы cookie.Вам необходимо сбросить настройки браузера, чтобы принять файлы cookie, или спросить вас, хотите ли вы принимать файлы cookie.
  • Ваш браузер спрашивает, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.
    Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файл cookie.
  • Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Попробуйте другой браузер, если вы подозреваете это.
  • Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г.,
    браузер автоматически забудет файл cookie.Чтобы это исправить, установите правильное время и дату на своем компьютере.
  • Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.
    Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.

Почему этому сайту требуются файлы cookie?

Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Предоставить доступ без файлов cookie
потребует от сайта создания нового сеанса для каждой посещаемой вами страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.


Что сохраняется в файле cookie?

Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в файле cookie; никакая другая информация не фиксируется.

Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт
не может определить ваше имя электронной почты, если вы не решите ввести его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступ к
остальной части вашего компьютера, и только сайт, создавший файл cookie, может его прочитать.

Плесень, грибки и фунгицидные смывки?? | Пит-стоп маляров

Пума сказал:

Ну, я посмотрел на этого Сэма, и оказалось, что активным ингредиентом является Natriumhypochlorit, что в переводе с немецкого означает гипохлорит натрия, который содержится в бытовых отбеливателях, хотя и не всегда. И если бы вы участвовали в соревновании за самый дорогой продукт в мире, я думаю, вы могли бы достичь статуса подиума с этим продуктом по 20 фунтов стерлингов за пол-литра.

Бытовой отбеливатель с вышеуказанным ингредиентом или соляной кислотой без проблем убьет все, разбавьте его 1-3 или 1-2.Просто наденьте перчатки, защитные очки, прикройте руки и держите рядом ведро с водой, если что-то начнет щипать — это вам не кислота из «Чужого».

Нажмите, чтобы развернуть…

отлично спасибо, получил отбеливатель, есть
Смотри в кислоту!! 90% работы приходится на гальку, так что не так много растений, подъездных дорог и т. д., которые можно покрыть листами. classidur был бы удобным предметом, который он имеет на борту, хотя я думаю, просто используйте его с умом, я думаю

Не кислота, как у инопланетян, мне просто нужно одеться, как я???

Безопасность[править]

Концентрация
по весу Классификация[34] Фразы риска
10–25 % Раздражающее (Xi) R36/37/38
> 25 % коррозионный (C) R34 R37
Концентрированная соляная кислота (дымящая соляная кислота) образует кислые туманы.И туман, и раствор оказывают разъедающее воздействие на ткани человека с потенциалом необратимого повреждения органов дыхания, глаз, кожи и кишечника. При смешивании соляной кислоты с обычными окислителями, такими как гипохлорит натрия (отбеливатель, NaClO) или перманганат калия (KMnO4), образуется токсичный газ хлор.

NaClO + 2 HCl → h3O + NaCl + Cl2
2 KMnO4 + 16 HCl → 2 MnCl2 + 8 h3O + 2 KCl + 5 Cl2
Средства индивидуальной защиты, такие как резиновые перчатки или перчатки из ПВХ, защитные очки, химически стойкая одежда и обувь, используются для минимизации рисков при работе с соляной кислотой.Агентство по охране окружающей среды США оценивает и регулирует соляную кислоту как токсичное вещество.

 

Недооцененная мишень для противогрибковой терапии

Образец цитирования: Ibe C, Munro CA (2021) Грибковая клеточная стенка: недооцененная мишень для противогрибковой терапии. PLoS Pathog 17 (4):
е1009470.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1009470

Редактор: Мэри Энн Джабра-Ризк, Мэрилендский университет, Балтимор, США

Опубликовано: 22 апреля 2021 г.

5 9007 Авторское право © 2021 Ибе, Манро.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Финансирование: Авторы хотели бы отметить поддержку Университета Абердина и Государственного университета Абии. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Структура клеточной стенки

Клеточная стенка основного грибкового патогена Candida albicans состоит из внешнего слоя, состоящего из сильно маннозилированных белков. Белки прикреплены к внутреннему слою клеточной стенки и кажутся перпендикулярными поверхности клетки, образуя фибриллярную белковую оболочку (, рис. 1A, ). Богатый полисахаридами внутренний слой в основном состоит из β-1,6- и β-1,3-глюканов и хитина, в то время как β-1,3-глюканы и хитин являются структурными полисахаридами клеточной стенки.

Рис. 1.

Модель, иллюстрирующая архитектуру клеточной стенки и противогрибковые агенты, воздействующие на определенные компоненты клеточной стенки (A). Доступно несколько противогрибковых средств, воздействующих на клеточную стенку, но только эхинокандины были лицензированы для лечения грибковых инфекций; исследования ингибитора β-1,6-глюкана не увенчались успехом. Путь целостности клеточной стенки, ведущий к толерантности к каспофунгину (B). Путь Pkc активируется в ответ на повреждение клеточной стенки, вызванное ингибированием синтеза β-1,3-глюкана эхинокандинами.Сигнал об ослаблении клеточной стенки передается мембраносвязанными механосенсорами, такими как члены семейства Wsc, для активации Rho1. Rho1 активирует Pkc1, который, в свою очередь, активирует нижестоящий каскад киназы MAP, приводящий к фосфорилированию Mkc1. Затем активируется ряд факторов транскрипции, включая Cas5 и Rlm1, которые включают экспрессию генов, участвующих в построении и ремоделировании клеточной стенки. Сигнальный путь кальция участвует в реакции спасения клеточной стенки. Путь активируется Ca 2+ , который проникает в клетку через локализованные в мембране каналы или высвобождается из внутриклеточных запасов.Ca 2+ связывается с кальмодулином (Cmd1) и активирует его. Cmd1 активирует фосфатазу кальциневрин, которая состоит из 2 субъединиц Cna1 и Cnb1. Кальциневрин дефосфорилирует фактор транскрипции Crz1. Затем Crz1 перемещается в ядро ​​и индуцирует экспрессию генов посредством связывания с CDRE в их промоторных последовательностях. Сигнальный путь кальция регулирует генов CHS . CDRE, кальций-зависимые элементы ответа; CWPGs, гены белков клеточной стенки; GPI, гликозилфосфатидилинозитол.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1009470.g001

Разработка противогрибковой терапии, нацеленной на клеточную стенку, привлекла большое внимание (, рис. 1A ), но с ограниченным успехом. Единственными противогрибковыми агентами, воздействующими на клеточную стенку, лицензированными для лечения инфекций человека, являются эхинокандины.

Какой полисахарид клеточной стенки является наиболее привлекательной противогрибковой мишенью?

Хитин

Хитин представляет собой линейный гомополимер β-1,4-связанного N -ацетилглюкозамина (GlcNAc) и необходим для жизнеспособности клеток.Хитин синтезируется семейством локализованных в мембране ферментов хитинсинтазы (Chs1-3 и Chs8 в C . albicans ), и Chs1 является незаменимым [1]. Полиоксины и никкомицины являются мощными ингибиторами фермента Chs, которые конкурируют с субстратом Chs UDP-GlcNAc за связывание Chs из-за их структурного сходства, но имеют ограниченное влияние на целые клетки. Никкомицин Z эффективен против видов Coccidioides , вызывающих респираторные инфекции. Препарат уменьшил грибковую нагрузку на легкие на 6-log 40 через 2 дня после заражения, но клинические испытания были прекращены из-за отсутствия финансирования [1,2].

Ферменты, участвующие в синтезе хитина, имеют специализированные функции, но могут быть функционально дублирующими в определенных условиях. Кроме того, тонкие различия в структуре белков между членами семейства Chs усложняют разработку эффективных ингибиторов хитинсинтазы. Например, Chs1-специфический ингибитор, RO-09-3143, блокирует образование перегородки с помощью Chs1 и останавливает рост клеток, но ингибирование Chs1 было летальным только у мутанта с делецией chs2Δ , что предполагает функциональную избыточность [3].Было обнаружено, что другие ингибиторы хитинсинтазы, такие как 3-замещенные производные амино-4-гидроксикумарина, обладают противогрибковой активностью [4], но ни один из них не применялся в клинике.

β-1,3-глюкан

β-1,3-глюкан представляет собой полимер звеньев глюкозы и может существовать в стабильной тройной спиральной структуре, что придает ему некоторую степень эластичности и прочности на разрыв, что делает его основным структурным полисахаридом в клеточной стенке большинства грибов [5]. β-1,3-глюкан был наиболее привлекательной противогрибковой мишенью из-за его центральной структурной роли в клеточной стенке.β-1,3-глюкан синтезируется основными ферментами β-1,3-глюкансинтазы, состоящими из каталитической субъединицы интегрального мембранного белка, Fks, и регуляторной субъединицы, Rho1 (, рис. 1A, ). Эхинокандины (каспофунгин, микафунгин и анидулафунгин) представляют собой класс противогрибковых средств, которые неконкурентно ингибируют синтез β-1,3-глюкана посредством ингибирования Fks [6]. Они фунгицидны в отношении видов Candida [7]. Устойчивость к эхинокандинам у видов Candida обусловлена ​​мутациями FKS1 , а толерантность возникает из-за ремоделирования клеточной стенки и компенсаторной активации синтеза хитина.Недавно были идентифицированы другие ингибиторы β-1,3-глюкана, такие как энфумифунгин. Ведущая молекула SCY-078 (ибрексафунгерп) представляет собой перорально активное синтетическое производное энфумифунгина с противогрибковой активностью in vitro. In vivo ибрексафунгерп широко распределяется в тканях и активен в отношении видов Candida и Aspergillus [8]. Лекарственная устойчивость к ибрексафунгерпу была сопоставлена ​​с FKS1 , хотя штаммы, устойчивые к эхинокандинам, не проявляют перекрестной устойчивости к ибрексафунгерпу, что подчеркивает различные механизмы действия обоих агентов [9–12].Фаза I клинических испытаний препарата показала тромботические явления легкой и средней степени тяжести, связанные с воспалением, у здоровых добровольцев; пероральные и внутривенные лекарственные формы, предназначенные для фазы II клинических испытаний в третьем квартале 2018 г., были завершены, в то время как клиническое исследование фазы III для оценки эффективности перорального ибрексафунгерпа при рецидивирующем вульвовагинальном кандидозе продолжается и, по оценкам, будет завершено в сентябре 2021 г.

Другие разрабатываемые ингибиторы синтеза β-1,3-глюкана включают резафунгин (CD101), новый эхинокандин [13] и пиперазинилпиридазинон [14]. Резафунгин является структурным аналогом анидулафунгина с активностью in vivo в отношении видов Candida и Aspergillus . Резафунгин в настоящее время находится на III фазе клинических испытаний. Пиперазинил-пиридазиноны обладают активностью in vitro в отношении видов Candida и Aspergillus , а также других грибов, а также активностью in vivo в отношении Candida glabrata . Пиперазинилпиридазинон эффективен против резистентных к эхинокандину C . albicans , вероятно, потому, что он связывается с областью Fks1, отличной от эхинокандинов [14].Значительный успех был достигнут в разработке ингибиторов синтеза β-1,3-глюкана отчасти потому, что β-1,3-глюкан синтезируется единственной синтазой.

β-1,6-глюкан

β-1,6-глюкан играет центральную роль в организации и структуре клеточной стенки, связывая белки клеточной стенки (CWP) с матриксом клеточной стенки [15]. Несколько генов, таких как KRE9 , KRE6 и KRE5 , были связаны с синтезом β-1,6-глюкана у S . cerevisiae и C . albicans [16]. Синтез β-1,6-глюкана был предложен в качестве многообещающей лекарственной мишени, подкрепленной тем фактом, что Ca Kre9 необходим. Недоступность специфического белка, каталитическая активность которого напрямую связана с синтезом β-1,6-глюкана, затруднила разработку ингибиторов, несмотря на его важность в организации клеточной стенки. Было обнаружено, что производное пиридобензимидазола, D75-4590, нацеливается и ингибирует Kre6. С . Клетки albicans , обработанные D75-4590, имели сниженный уровень β-1,6-глюкана.Другие производные пиридобензимидазола, такие как D21-6076, обладают активностью in vitro и in vivo в отношении C . albicans и C . голая . Обнаружен синергический эффект при взаимодействии ингибитора β-1,6-глюкана, D11-2040, и каспофунгина в отношении C . albicans [17].

Являются ли маннопротеины клеточной стенки лучшими противогрибковыми мишенями, чем полисахариды клеточной стенки?

Маннопротеины клеточной стенки состоят из нескольких классов; 88% составляют белки, модифицированные гликозилфосфатидилинозитолом (GPI). GPI-модифицированные маннопротеины участвуют в синтезе, организации и ремоделировании клеточной стенки, а также в вирулентности. К ним относятся белки с гликозилгидролазной, гликозилтрансферазной или трансгликозидазной активностью, такие как семейства Crh и Phr, которые функционируют во внеклеточном пространстве, модифицируя, собирая и сшивая основные полимеры клеточной стенки, экструдированные в пространство стенки. Эти ферменты являются отличными противогрибковыми мишенями, которые действуют ниже путей спасения клеточной стенки, и ингибирование их синтеза и локализации в клеточной стенке может значительно повлиять на вирулентность и биосинтез клеточной стенки.Были идентифицированы молекулы, которые могут препятствовать посттрансляционной модификации маннопротеинов клеточной стенки: гликозилированию, синтезу и присоединению якоря GPI. Одним из них является молекула на основе пиридин-2-амина, APX001A, которая ингибирует ацилирование инозитолового кольца во время синтеза якоря GPI, этап, катализируемый Gwt1, инозитолацилтрансферазой. Делеция GWT1 является летальной или приводит к температурной чувствительности и медленному росту, в зависимости от генетического фона штамма.APX001A эффективен в низких концентрациях против видов Candida , Aspergillus , Fusarium и Scedosporium . Он также эффективен против устойчивых к каспофунгину штаммов C . альбиканс . APX001A проявлял повышенную активность in vitro и in vivo в отношении Candida auris по сравнению с анидулафунгином. Феноксиацетанилид (гепинацин) также может ингибировать Gwt1 и обладает противогрибковой активностью в отношении различных дрожжей и плесени [18]. M720 представляет собой ингибитор фосфоэтаноламинтрансферазы-I, Mcd4, участвующий в пути синтеза якоря GPI с активностью in vivo в отношении C . albicans [19]. APX001A и M720 обладают синергетическим эффектом по сравнению с C . albicans [19]. Другие ферменты, участвующие в синтезе якоря GPI, такие как Smp3, также были предложены в качестве терапевтических мишеней [20, 21]. Производные родамин-3-уксусной кислоты, такие как OGT2468, ингибируют синтез маннопротеина клеточной стенки путем ингибирования гликозилирования белка [22].

Маннопротеины клеточной стенки как потенциальные мишени для лекарств и вакцин открывают новые возможности для борьбы с грибковой инфекцией, хотя они привлекли относительно меньше внимания/успеха по сравнению с разработкой противогрибковых средств, нацеленных на синтез β-1,3-глюкана.

Являются ли локализованные в клеточной стенке факторы вирулентности перспективными мишенями для разработки вакцин и иммунотерапии?

Лицензированных вакцин против грибковых заболеваний не существует, и у большинства людей, страдающих системными микозами, нарушен иммунитет, что делает их восприимчивыми к инвазивным инфекциям. При ослабленном иммунитете иммунотерапиям будет трудно искоренить инфекцию. Эта ограниченная эффективность противогрибковых препаратов может быть улучшена путем разработки терапии антителами.Гликопротеины клеточной стенки грибов участвуют в адгезии к поверхностям, медицинским устройствам и клеткам-хозяевам. GPI-модифицированные белки необходимы для морфогенеза, вирулентности и устойчивости к макрофагам, что делает их потенциальными кандидатами для разработки вакцин и иммунотерапии [23].

Основная группа адгезинов C . albicans представляет собой семейство из 8 поверхностных гликопротеинов с агглютининоподобной последовательностью (ALS), кодируемых генами ALS . Белки Als являются мощными факторами вирулентности, и было показано, что рекомбинантные N-концы Als1 и Als3 обладают профилактическим действием.Было обнаружено, что вакцина rAls1-N защищает мышей от орофарингеального и диссеминированного кандидоза. Вакцина rAls3-N защищает мышей от C . albicans инфекций путем стимуляции лимфоцитов Th2/Th27 к выработке высоких уровней IFN-γ и IL-17A, а также хемокинов. Эти цитокины усиливают способность фагоцитов уничтожать патоген. Было показано, что вакцина защищает иммунокомпетентных мышей от системного, орофарингеального и вагинального кандидоза. Испытания вакцины rAls3-N на людях продолжаются [24], и данные показывают, что вакцина безопасна и вызывает быстрый и сильный иммунный ответ [25].

Hwp1 и Hyr1 представляют собой маннопротеины внешней поверхности, обнаруживаемые в зародышевых трубках и клетках гиф C . альбиканс . Было обнаружено, что рекомбинантная вакцина Hyr1 защищает мышей от гематогенно диссеминированного кандидоза. Антитела к rHyr1 нейтрализуют антигенный эффект Hyr1 in vitro и in vivo [26]. Hwp1 был использован в конструкции синтетической гликопептидной вакцины, сочетающей β-маннан и пептидный эпитоп, который, как было обнаружено, защищает мышей от диссеминированного кандидоза.Эти кандидаты на вакцины являются многообещающими и вскоре могут получить клиническое одобрение.

С . albicans использует рецепторные белки, такие как Rbt5, на поверхности клетки для поглощения питательных веществ, таких как железо, во время инфекции. Считалось, что моноклональное антитело C7 проявляет кандидацидную активность, блокируя путь поглощения железа в C . albicans , хотя этот эффект обратим при добавлении железа в питательную среду [27].

Ингибирование или блокирование этих факторов вирулентности клеточной поверхности может быть полезным для замедления прогрессирования грибковых инфекций, особенно штаммов, устойчивых к лекарственным препаратам.Однако изобилие и избыточность, а также компенсаторная активность в функции этих белков затормозили быстрое развитие лекарств/вакцин/иммунотерапевтических средств. Тщательное исследование каждого белка клеточной поверхности может расширить список доступных белков-кандидатов для разработки профилактических, иммунотерапевтических и терапевтических средств.

Как компенсаторные механизмы клеточной стенки, приводящие к ремоделированию клеточной стенки, влияют на противогрибковую эффективность?

Эхинокандины используются в качестве препаратов первого ряда при инвазивном кандидозе.Устойчивость к эхинокандинам развилась в результате приобретения точечных мутаций в FKS1 или его паралогах. Эти точечные мутации сгруппированы вокруг 2 горячих точек, сопоставленных с аминокислотами в положениях с 641 по 649 (горячая точка 1) и с 1345 по 1365 (горячая точка 2). Точечные мутации, которые изменяют чувствительность к эхинокандину, снижают скорость фермента V max , но не аффинность связывания K m лекарственного средства с ферментом Fks. Серин часто заменяют фенилаланином, пролином или тирозином в положении 645.Эти мутации придают устойчивость в виде гомозиготных и гетерозиготных аллелей ко всем трем эхинокандинам. Однако не все мутации FKS1 связаны со сниженной чувствительностью к эхинокандинам [28]. Недавно в рамках проекта наблюдения SENTRY была изучена распространенность мутаций FKS1 в устойчивых к эхинокандину изолятах, и было обнаружено, что большинство протестированных устойчивых изолятов основных патогенных видов Candida не содержат этих мутаций [29], что позволяет предположить наличие альтернативных механизмов, включая ремоделирование клеточной стенки (, рис. 1B, ) может способствовать лекарственной устойчивости.β-1,3-глюкан и хитин, два структурных полимера клеточной стенки, усиливают и дополняют друг друга в динамическом процессе, опосредованном гликопротеинами стенки, для поддержания неповрежденной клеточной стенки. Ремоделирование клеточной стенки изменяет восприимчивость C . albicans и Aspergillus fumigatus к препаратам эхинокандина. Обработка in vitro C . albicans с субингибирующими концентрациями каспофунгина индуцирует повышенный синтез хитина в качестве компенсаторной реакции посредством активации сигнальных путей Pkc, кальцинейрина (, рис. 1B, ) и HOG.Активация пути повреждения клеточной стенки приводит к ремоделированию клеточной стенки/хитина, что приводит к утолщению стенки с повышенным содержанием хитина. С . Клетки albicans с повышенным содержанием хитина в стенке менее чувствительны к обработке каспофунгином in vitro и in vivo [30]. Наблюдаемое повышение содержания хитина в клеточной стенке, по-видимому, является адаптивным механизмом для поддержания интактной клеточной стенки, а не генетическим изменением, но ремоделирование клеточной стенки может дать грибу возможность приобрести точечные мутации, которые впоследствии закрепляют устойчивость к эхинокандину у население.Некоторые C . Было обнаружено, что клинические изоляты, устойчивые к albicans , имеют очаговые мутации в дополнение к более толстой стенке с повышенным содержанием хитина [31,32]. Это привело к предположению, что комбинированная терапия, блокирующая синтез как глюкана, так и хитина, может быть привлекательной для отмены приобретения толерантности и резистентности к каспофунгину.

Путь CWI и активация синтеза хитина должны быть преодолены, чтобы снизить резистентность и повысить эффективность терапии, направленной на β-1,3-глюкан.Было обнаружено несколько новых ингибиторов β-1,3-глюкансинтазы. Если они клинически одобрены, они могут постичь ту же судьбу, что и эхинокандины, активируя компенсаторную деятельность по ремоделированию клеточной стенки при использовании в субоптимальных концентрациях или из-за сниженной биодоступности в некоторых нишах хозяина. Таким образом, клинически одобренный агент, который прямо и неконкурентно ингибирует синтез хитина, может повысить клиническую полезность ингибиторов β-1,3-глюкана с точки зрения спектра активности и эффективности.

Клеточная стенка остается одной из наиболее привлекательных противогрибковых мишеней, но это практически неиспользованная область исследований по сравнению с бактериальной клеточной стенкой с точки зрения клинически одобренных препаратов, воздействующих на стенку. Даже с недавними успехами в понимании биогенеза клеточной стенки необходимы дополнительные исследования, если более эффективные противогрибковые методы лечения должны получить клиническое одобрение.

Каталожные номера

  1. 1.
    Шубиц Л.Ф., Трин Х.Т., Перрилл Р.Х., Томпсон К.М., Ханан Н.Дж., Галгиани Д.Н. и др.Моделирование дозирования и фармакологии никкомицина Z при легочном кокцидиомикозе мышей в рамках подготовки к клиническим испытаниям фазы 2. J заразить Dis. 2014 15 июня; 209 (12): 1949–54. пмид:24421256
  2. 2.
    Шубиц Л.Ф., Рой М.Е., Никс Д.Е., Галджиани Д.Н. Эффективность Никкомицина Z при респираторном кокцидиомикозе у собак, инфицированных естественным путем. Мед Микол. 2013 г., октябрь; 51 (7): 747–54. пмид:23488972
  3. 3.
    Судох М., Ямадзаки Т., Масубучи К., Танигути М., Шимма Н., Арисава М. и др. Идентификация нового ингибитора, специфичного для хитинсинтазы грибов.Ингибирование хитинсинтазы 1 останавливает рост клеток, но ингибирование хитинсинтазы 1 и 2 является летальным для патогенного грибка Candida albicans . Дж. Биол. Хим. 2000 г., 20 октября; 275 (42): 32901–5. пмид:10930406
  4. 4.
    Ge Z, Ji Q, Chen C, Liao Q, Wu H, Liu X и ​​др. Синтез и биологическая оценка новых производных 3-замещенных амино-4-гидроксикумаринов в качестве ингибиторов хитинсинтазы и противогрибковых средств. J Enzyme Inhib Med Chem. 2016;31(2):219–28. пмид:25815669
  5. 5.Руиз-Эррера Дж., Элорза М.В., Валентин Э., Сентандреу Р. Молекулярная организация клеточной стенки Candida albicans и ее связь с патогенностью. FEMS Yeast Res. 2006 г., январь; 6 (1): 14–29. пмид:16423067
  6. 6.
    Дуглас С.М., Д’Ипполито Дж.А., Шей Г.Дж., Мейнц М., Ониши Дж., Марринан Дж.А. и соавт. Идентификация гена FKS1 Candida albicans в качестве основной мишени для ингибиторов 1,3-бета-D-глюкансинтазы. Противомикробные агенты Chemother.1997;41(11):2471–9. пмид:9371352
  7. 7.
    Эшпинель-Ингрофф А. Сравнение активности In vitro нового триазола SCH56592 и эхинокандинов MK-0991 (L-743,872) и LY303366 против условно-патогенных мицелиальных и диморфных грибов и дрожжей. Дж. Клин Микробиол. 1998 окт; 36 (10): 2950–6. пмид:9738049
  8. 8.
    Pfaller MA, Messer SA, Motyl MR, Jones RN, Castanheira M. Активность MK-3118, нового перорального ингибитора глюкансинтазы, протестирована против Candida spp.двумя международными методами (CLSI и EUCAST). J Антимикробная химиотерапия. 2013 г., апрель; 68 (4): 858–63. пмид:231
  9. 9.
    Ламот Ф., Александр Б.Д. Противогрибковая активность SCY-078 (MK-3118) и стандартных противогрибковых агентов в отношении клинических изолятов плесени, не относящихся к Aspergillus . Противомикробные агенты Chemother. 2015 июль; 59 (7): 4308–11. пмид:25896696
  10. 10.
    Хименес-Ортигоса С., Падеру П., Мотыль М.Р., Перлин Д.С. Производное энфумафунгина MK-3118 проявляет повышенную активность in vitro в отношении клинически устойчивых к эхинокандину видов Candida и изолятов видов Aspergillus .Противомикробные агенты Chemother. 2014 г., февраль; 58 (2): 1248–51. пмид:24323472
  11. 11.
    Лепак А.Дж., Марчилло К., Анды Д.Р. Фармакодинамическая целевая оценка нового перорального ингибитора глюкансинтазы, SCY-078 (MK-3118), с использованием мышиной модели инвазивного кандидоза in vivo . Противомикробные агенты Chemother. 2015 г., февраль; 59 (2): 1265–72. пмид:25512406
  12. 12.
    Pfaller MA, Messer SA, Motyl MR, Jones RN, Castanheira M. In vitro активность нового перорального ингибитора глюкансинтазы (MK-3118) протестирована против Aspergillus spp.методами микроразведения бульона CLSI и EUCAST. Противомикробные агенты Chemother. 2013 г., февраль; 57 (2): 1065–8. пмид:23229479
  13. 13.
    Онг В., Хаф Г., Шлоссер М., Бартизал К., Балковец Дж. М., Джеймс К. Д. и др. Доклиническая оценка стабильности, безопасности и эффективности CD101, нового эхинокандина. Противомикробные агенты Chemother. 2016 21 октября; 60 (11): 6872–9. пмид:27620474
  14. 14.
    Уокер С.С., Сюй И, Триантафиллоу И., Уолдман М.Ф., Мендрик С., Браун Н. и др. Открытие нового класса перорально активных противогрибковых ингибиторов бета-1,3-D-глюкансинтазы.Противомикробные агенты Chemother. 2011;55(11):5099–106. пмид:21844320
  15. 15.
    Коллар Р., Рейнхольд Б. Б., Петракова Э., Йех Х.Дж., Эшвелл Г., Дргонова Дж. и соавт. Архитектура клеточной стенки дрожжей. Бета(1—>6)-глюкан связывает маннопротеин, бета(1—>)3-глюкан и хитин. Дж. Биол. Хим. 1997 г., 11 июля; 272 (28): 17762–75. пмид:

    29
  16. 16.
    Гилберт Н.М., Донлин М.Дж., Герик К.Дж., Шпехт К.А., Джорджевич Дж.Т., Уилсон С.Ф. и соавт. генов KRE необходимы для синтеза бета-1,6-глюкана, поддержания архитектуры капсулы и закрепления белка клеточной стенки у Cryptococcus neoformans .Мол микробиол. 2010 г., апрель; 76 (2): 517–34. пмид:20384682
  17. 17.
    Китамура А., Сомея К., Окумура Р., Хата М., Такешита Х., Накадзима Р. Противогрибковая активность D11-2040, ингибитора бета-1,6-глюкана in vitro, с доступными в настоящее время противогрибковыми препаратами или без них. Биол Фарм Бык. 2010;33 (2):192–7. пмид:20118539
  18. 18.
    Маклеллан К.А., Уайтселл Л., Кинг О.Д., Ланкастер А.К., Мазичек Р., Линдквист С. Ингибирование биосинтеза якоря GPI в ​​грибах вызывает стресс эндоплазматического ретикулума и повышает иммуногенность. ACS Chem Biol. 2012 г., 21 сентября; 7 (9): 1520–8. пмид:22724584
  19. 19.
    Манн П.А., Маклеллан К.А., Косеоглу С., Си К., Кузьмин Э., Флэттери А. и соавт. Открытие противогрибковых препаратов на основе химической геномики: нацеливание на биосинтез предшественника гликозилфосфатидилинозитола (GPI). ACS Infect Dis. 2015 г., 9 января; 1 (1): 59–72. пмид: 26878058
  20. 20.
    Grimme SJ, Westfall BA, Wiedman JM, Taron CH, Orlean P. Необходимый белок Smp3 необходим для добавления четвертой маннозы с боковым разветвлением во время сборки гликозилфосфатидилинозитолов дрожжей.Дж. Биол. Хим. 2001 г., 20 июля; 276 (29): 27731–9. пмид:11356840
  21. 21.
    Nishikawa A, Poster JB, Jigami Y, Dean N. Молекулярный и фенотипический анализ CaVRG4 , кодирующего важный переносчик GDP-маннозы аппарата Гольджи. J Бактериол. 2002 г., январь; 184 (1): 29–42. пмид:11741841
  22. 22.
    Арройо Дж., Хатцлер Дж., Бермеджо С., Рагни Э., Гарсия-Канталехо Дж. , Ботиас П. и др. Функциональный и геномный анализ блокированного О-маннозилирования белка в пекарских дрожжах. Мол микробиол.2011 март; 79 (6): 1529–46. пмид:21231968
  23. 23.
    Айб С., Уокер Л.А., Гоу Н., Манро К.А. Раскрытие терапевтического потенциала грибковой клеточной стенки: клинические последствия и лекарственная устойчивость. В: Прасад Р., редактор. Candida albicans : Клеточная и молекулярная биология. Соединенное Королевство: Springer International Publishing; 2017. с. 313–46.
  24. 24.
    Spellberg BJ, Ibrahim AS, Avanesian V, Fu Y, Myers C, Phan QT, et al. Эффективность вакцин против Candida rAls3p-N или rAls1p-N против диссеминированного и слизистого кандидоза.J заразить Dis. 2006 г., 15 июля; 194 (2): 256–60. пмид:16779733
  25. 25.
    Эдвардс Дж. Э. Младший, Шварц М. М., Шмидт К. С., Собель Дж. Д., Ньирджеси П., Шодель Ф. и соавт. Грибковая иммунотерапевтическая вакцина (NDV-3A) для лечения рецидивирующего вульвовагинального кандидоза — рандомизированное двойное слепое плацебо-контролируемое исследование фазы 2. Клин Инфекция Дис. 2018 1 июня; 66 (12): 1928–36. пмид:29697768
  26. 26.
    Luo G, Ibrahim AS, Spellberg B, Nobile CJ, Mitchell AP, Fu Y. Candida albicans Hyr1p придает устойчивость к уничтожению нейтрофилов и является потенциальной мишенью вакцины.J заразить Dis. 2010 1 июня; 201 (11): 1718–28. пмид:20415594
  27. 27.
    Брена С., Кабесас-Олкос Дж., Морагес М.Д., Фернандес де Ларриноа И., Домингес А., Куиндос Г. и др. Фунгицидное моноклональное антитело С7 препятствует усвоению железа Candida albicans . Противомикробные агенты Chemother. 2011 июль; 55 (7): 3156–63. пмид:21518848
  28. 28.
    Александр Б.Д., Джонсон М.Д., Пфайффер К.Д., Хименес-Ортигоса С., Катания Дж., Букер Р. и др. Повышение устойчивости к эхинокандину у Candida glabrata : клиническая неудача коррелирует с наличием мутаций FKS и повышенными минимальными ингибирующими концентрациями.Клин Инфекция Дис. 2013 июнь; 56 (12): 1724–32. пмид:23487382
  29. 29.
    Кастанейра М., Мессер С.А., Ромберг П.Р., Пфаллер М.А. Модели чувствительности к противогрибковым препаратам глобальной коллекции изолятов грибов: результаты программы эпиднадзора за противогрибковыми препаратами SENTRY (2013 г.). Диагностика Microbiol Infect Dis. 2016 июнь; 85 (2): 200–4. пмид:27061369
  30. 30.
    Lee KK, Maccallum DM, Jacobsen MD, Walker LA, Odds FC, Gow NA, et al. Повышенный уровень хитина в клеточной стенке у Candida albicans придает резистентность к эхинокандину in vivo.Противомикробные агенты Chemother. 2012 г., январь; 56 (1): 208–17. пмид:21986821
  31. 31.
    Имтиаз Т., Ли К.К., Манро К.А., Маккаллум Д.М., Шенкленд Г.С., Джонсон Э.М. и др. Резистентность к эхинокандину из-за одновременной мутации FKS и повышения уровня хитина клеточной стенки в изоляте Candida albicans из кровотока после кратковременного воздействия каспофунгина. J Med Microbiol. 2012, сен; 61 (часть 9): 1330–4. пмид:22653922
  32. 32.
    Бен-Ами Р., Гарсия-Эффрон Г., Льюис Р.Э., Гамарра С., Левентакос К., Перлин Д.С. и др.Затраты на приспособленность и вирулентность Candida albicans FKS1 мутаций горячей точки, связанных с устойчивостью к эхинокандину. J заразить Dis. 2011 г., 15 августа; 204 (4): 626–35. пмид:217

Опрыскивание фунгицидами в цифрах — защита окружающей среды пестицидами

Фунгициды сгруппированы по «семействам» или «классам» , которые имеют общий механизм действия и химическую структуру. Группа режима действия (A, B и т. д.) относится к биохимическим процессам, ингибируемым фунгицидом, таким как синтез клеточной стенки, дыхание и т. д. Подгруппы (A1, A2 и т. д.) в рамках группы по способу действия относятся к конкретным биохимическим целевым участкам действия. Название группы (например, карбоновая кислота, бензамиды) дается каждой подгруппе. Группа будет содержать различные фунгициды, известные под их общим названием. Общее название напечатано в Заявлении об ингредиентах на этикетке фунгицида.

Комитет по борьбе с устойчивостью к фунгицидам (FRAC) разработал цифровой и буквенный код, который можно использовать для различения различных групп фунгицидов в зависимости от их механизма действия.Этот код известен как FRAC Code и теперь указан на этикетках фунгицидов. Коды FRAC организованы по цифрам и буквам (в настоящее время 45 пронумерованных групп и 3 буквенные группы).

Номера были присвоены в первую очередь в соответствии со временем выхода продукта на рынок. Буквы относятся к P = индукторам защиты растения-хозяина; M = многоцелевые фунгициды; и U = неизвестный механизм действия и неизвестный риск резистентности. Переклассификация соединений на основе новых исследований может привести к прекращению действия буквенных кодов.Это наиболее вероятно в U-образном сечении, когда уточняются способы действия. Для получения полного списка кодов FRAC , отсортированных по способу действия фунгицида, перейдите на www.frac.info , выберите «публикации» в списке в левой части страницы и щелкните «Список кодов FRAC» . (риск резистентности для каждой группы фунгицидов указан в столбце «комментарии»). В разделе публикаций на веб-сайте FRAC также имеется « FRAC List of Common Names Fungicide».

Кодовый ящик FRAC

Если фунгицид содержит более одного активного ингредиента (премикс), оба кода FRAC будут указаны в поле кода FRAC (см. пример справа). Если коды FRAC не указаны на лицевой стороне этикетки, их можно найти в разделе этикетки, посвященном управлению сопротивлением.

Фунгициды с одинаковым кодом FRAC имеют сходные механизмы действия и поэтому могут проявлять перекрестную устойчивость. Таким образом, крайне важно знать групповой код фунгицидов, используемых для лечения конкретного заболевания, чтобы избежать чередования между химически сходными фунгицидами. В отсутствие других альтернатив можно чередовать фунгициды между подгруппами (например, D1 и D2), если ясно, что в целевых популяциях не существует механизмов перекрестной устойчивости. Проконсультируйтесь с местными экспертами или посетите сайт www.frac.info для получения дополнительной информации.

Составитель: Доктор Уэйн Бюлер, доктор философии

Участие ингибируемого связывания кальция с клеточной стенкой в ​​фунгицидной активности
CAN-296 | Журнал антимикробной химиотерапии

Реферат

CAN-296 представляет собой термостабильный сложный углевод (молекулярная масса 4300 Да), изолированный
из клеточной стенки мицелиального гриба Mucor rouxii .Обладает мощным in-vitro
фунгицидная активность в отношении широкого спектра патогенных дрожжей, в том числе резистентных к азолам
изоляты Candida albicans и Candida glabrata . В качестве предварительного шага в
Изучая механизм действия этого нового противогрибкового средства, мы исследовали влияние различных
катионов на противогрибковую активность, а также связывание CAN-296 с интактными клетками и клеточной стенкой
фракции C. albicans . Противогрибковая активность CAN-296 ингибировалась низким
концентрации кальция, магния и лития и высокие концентрации бария, кобальта
и марганцем, но не калием и медью.Кальций-опосредованное ингибирование
противогрибковая активность CAN-296 была легко обратима при удалении кальция диализом, и
фунгицидная активность ингибируемого соединения полностью восстанавливалась. Поглощение/связывание
CAN-296 к интактным клеткам и к фракции клеточной стенки C. albicans был временем и
зависит от концентрации. Максимальное поглощение/связывание было получено при 5 мг/л в течение 60 мин.
был связан с агрегацией интактных клеток. Промывка интактных клеток и фракции клеточной стенки
преинкубация с меченым радиоактивным изотопом CAN-296 со 150-кратным избытком немеченого соединения не дала
удалить CAN-296, связанный с интактными клетками и фракцией клеточной стенки, предполагая, что
привязка CAN-296 к C.albicans герметичен. Поглощение/связывание CAN-296 и
Лекарственно-опосредованная агрегация интактных клеток ингибировалась кальцием в зависимости от концентрации.
способ. Тот факт, что CAN-296 является фунгицидным агентом, который связывается с интактными клетками и клеточной стенкой.
фракция C. albicans очень плотно, вместе с наблюдением, что кальций способен
ингибировать фунгицидную активность, а также поглощение/связывание CAN-296, предполагает, что
механизм действия этого нового противогрибкового средства может включать взаимодействие с клеточной стенкой C.альбиканс.

Введение

CAN-296 представляет собой природный термостабильный сложный углевод, выделенный из клетки.
стенка грибка Mucor rouxii . Он состоит в основном из 1,4-, 3,4- и 4,6-связанных, а
концевые N -ацетилглюкозаминовые остатки. Ранее мы показали, что CAN-296
обладает отличной фунгицидной активностью in vitro в отношении широкого спектра патогенных дрожжей
включая устойчивые к азолам изоляты Candida albicans и Candida glabrata. 1 По сравнению с азолами и полиеновыми соединениями имеет
узкий диапазон МИК и быстрое начало фунгицидного действия (уничтожение 99,9% в течение 60 мин).
CAN-296, по-видимому, не имеет перекрестной резистентности с какими-либо противогрибковыми средствами, используемыми в настоящее время. 1

Механизм действия этого нового соединения неизвестен. В последние годы роль
углеводы в биологических взаимодействиях получают все большее признание. 2 Рецепторы, связывающие углеводы, инициирующие разнообразные сигналы
пути трансдукции описаны в гепатоцитах, 3 альвеолярных макрофагах 4 и других системах. 5 Поскольку клеточная стенка дрожжей представляет собой динамическую систему, состоящую из
преимущественно сложных углеводов и белков, мы предположили, что механизм действия
CAN-296 может включать взаимодействие этого соединения с клеточной стенкой грибка. В этой статье мы
представить данные, чтобы предположить, что CAN-296 связывается с клеточной стенкой грибов и опосредует агрегацию C. albicans . Вызванная CAN-296 агрегация грибковых клеток может быть начальным шагом
что приводит к мощному фунгицидному действию этого соединения.

Материалы и методы

Состояние организма и культуры

C. albicans получен из Американской коллекции типовых культур (ATCC)
использовался повсеместно. Для приготовления рабочей культуры требуется примерно 0,01 мл исходной культуры.
(хранится при -70°C в лакмусовом молоке; Becton Dickinson Microbiology Systems,
Кокисвилль, Мэриленд, США), высевали на декстрозный агар Сабуро (SDA) и инкубировали в течение
48 ч.Из этой первичной культуры одну колонию пересевают (24 часа) на SDA и используют в качестве
источник инокулята для всех экспериментов.

Анализ фунгицидной активности

Свежая 24-часовая культура C. albicans , приготовленная в дрожжевом экстракте пептон-декстроза
(YPD) бульон (Sigma Chemical Company, Сент-Луис, Миссури, США) разбавляли примерно
1000-кратно, чтобы получить плотность клеток 1 × 10 6 КОЕ/мл. Аликвоты по 1 мл разбавленной культуры инкубировали с
ингибирующая концентрация (10 мг/л) CAN-296 в течение 60 мин при 35°С.Аликвоты по 0,05 мл
обработанную клеточную суспензию удаляли, серийно разбавляли (от 10 2 до 10 6 раз) и трижды аликвоты по 0,1 мл распределяли на агаре YPD (Sigma Chemical
Компания) тарелки. Планшеты инкубировали при 35°С в течение 24 ч и количестве КОЕ/мл
культура была рассчитана и нанесена на график в зависимости от различных переменных. Где применимо, контроль роста
без CAN-296 и сравнивали с исследованием время-уничтожение, как ранее
описано. 1

Чтобы определить влияние различных катионов на фунгицидную активность CAN-296,
примерно 1 × 10 6 клеток C. albicans инкубировали в 1 мл бульона YPD с
препарат (10 мг/л) в присутствии различных концентраций (0,312–5 г/л) CaCl 2 , BaCl 2 , CoCl 4 , CuCl 2 , KCl, LiCl, MgCl 2 и MnCl 3 в течение 60 мин, и анализ фунгицидной активности проводили, как описано
над.

Диализ

Аликвоты по 1 мл раствора CAN-296 (250 мг/л) инкубировали в двух повторностях с
CaCl 2 (20 г/л), при 35°C в течение 60 мин. Затем обработанный кальцием CAN-296 был
переносят в стерильные диализные мешки (Spectrum, Houston, TX, USA) и подвергают диализу против стерильных
бидистиллированной воды (1 л) при 4°С в течение ночи. Диализирующий раствор дважды меняли. То
Затем содержимое диализных мешков собирали в микроцентрифужных пробирках и нагревали до 65°С в течение
60 минут для уничтожения любых загрязняющих микроорганизмов.Раствору CAN-296 давали остыть до
комнатной температуре и использовали в анализах фунгицидной активности, как описано выше. Диализированный Ca 2+ -необработанный CAN-296 и Ca 2+ -обработанный, но недиализированный CAN-296 использовали в качестве контролей.

Анализ агрегации

C. albicans клеток (1 × 10 7 клеток в 1 мл бульона YPD) инкубировали с CAN-296 10 мг/л в присутствии
и отсутствие хлорида кальция (0-2. 78 г/л) при 35°С в течение 60 мин. Примерно 2
µ
L-аликвоты клеточной суспензии помещали на предметное стекло микроскопа в разное время.
интервалы и визуально проверяют на образование агрегатов. Интактные клетки, инкубированные с
кальция в отсутствие CAN-296 использовали в качестве контроля.

Получение фрагментов клеточной стенки

Клетки C. albicans выращивали в течение 18 ч в 1 л бульона YPD при 35°C,
собирали центрифугированием (5000 г в течение 1 мин при 4°С) и дважды промывали 30 мМ
Трис-буфер (pH 7.0). Полученный осадок хранили при -20°С. Замороженная пеллета
(приблизительно 2 г влажного веса) переносят в ступку и измельчают в мелкий порошок с
пестиком в сухом льду с 0,5 г стеклянных шариков/г сырой массы клеточного осадка. Наземные клетки были
ресуспендировали в 10 мл 30 мМ Трис-буфера (pH 7,0) и центрифугировали при 500 g в течение 10
мин при 4°C для удаления неповрежденных клеток, стеклянных шариков и других тяжелых твердых частиц.
Микроскопическое исследование супернатанта показало ≤10% интактных клеток.Осветленный
супернатант центрифугировали при 17500 g в течение 30 мин при 4°С для осаждения разрушенных
клетки и фрагменты клеточной стенки. Полученный осадок ресуспендировали в 30 мМ трис-буфере (pH
7,0), дважды промывали 30 мМ Трис-буфером (pH 7,0), ресуспендировали в 6 мл 30 мМ Трис-буфера.
(pH 7,0) и немедленно использовали для исследований связывания [ 3 H]CAN-296.

[

3 H] Исследования поглощения/связывания CAN-296

[ 3 H]-меченый CAN-296 (удельная активность 2 мКи/мл) был получен из
American Radiolabeled Chemicals Inc.(Сент-Луис, Миссури, США). C. albicans клеток
собирали, промывали и ресуспендировали в бульоне YPD при плотности клеток 2 × 10 7 клеток/мл. Аликвоты по 5 мл клеточной суспензии инкубировали в двух повторностях с
CAN-296 5 мг/л (удельная активность 1,0 мкКи/мкг CAN-296) при комнатной температуре в течение
Через различные промежутки времени отбирали аликвоты 60 мин и 0,5 мл. Клетки были собраны
центрифугирование в течение 1 мин в микроцентрифуге и трехкратное быстрое промывание центрифугированием
с 30 мМ трис-буфером (pH 7.0). Осадок промытых клеток ресуспендировали в 0,1 мл 30 мМ
Трис-буфер (pH 7,0) и радиоактивность, связанную с клетками, определяли с помощью
сцинтилляционный подсчет с 5 мл Aquasol (NEN Life Science Products, Бостон, Массачусетс, США) в качестве
сцинтилляционная жидкость.

Для изучения зависимости поглощения/связывания CAN-296 от концентрации в клетках C. albicans 2 × 10 7 клеток инкубировали в 1 мл бульона YPD в двух повторностях в
наличие [ 3 H]CAN-296 0.312–10 мг/л (удельная активность 1,0 мкКи/мкг
CAN-296) в течение 60 мин при комнатной температуре. Затем клетки собирали центрифугированием и
промывали и определяли радиоактивность, связанную с клетками, как описано выше.

Влияние промывания немеченым CAN-296 на поглощение [ 3 H]CAN-296 интактными клетками исследовали следующим образом. Приблизительно 1 × 10 8 клеток инкубировали в 5 мл бульона YPD в двух повторностях в присутствии [ 3 H]CAN-296 5 мг/л (удельная активность 1 мкКи/мкг CAN-296) при комнатной температуре.
температура 120 мин.Промывку инициировали добавлением 150-кратного избытка
немеченый CAN-296 через 60 мин инкубации. Аликвоты (0,5 мл) клеточной суспензии
удалены в различные промежутки времени до и после добавления немаркированного CAN-296 и
радиоактивность, связанная с клетками до и после добавления немеченого CAN-296, была
определяется, как описано выше.

Влияние кальция на поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 клетками C. albicans изучали путем инкубации 1 × 10 8 клеток в 5 мл бульона YPD в двух повторностях, содержащих [ 3 H]CAN-296 5 мг/л (удельная активность 1.0 мкКи/мкг CAN-296) в помещении
температуры в течение 60 мин в присутствии хлорида кальция в концентрации 0–5,5 г/л. Аликвоты (0,5
мл) клеточной суспензии удаляли с 15-минутными интервалами и определяли связанную с ней радиоактивность.
с клетками определяли, как описано выше.

Для изучения связывания [ 3 H]CAN-296 с фракцией клеточной стенки C. albicans , 3 мл клеточной стенки
препарат инкубировали в двух повторностях с [ 3 H]CAN-296 5 мг/л (удельная активность 1.0 мкКи/мкг CAN-296) для 120
мин при комнатной температуре. Аликвоты (0,5 мл) отбирали через различные промежутки времени и
Фрагменты клеточной стенки собирали и промывали 30 мМ трис-буфером (pH 7,0) путем
центрифугирование. Полученный осадок ресуспендировали в 0,1 мл трис-буфера и определяли радиоактивность.
связанные с фрагментами клеточной стенки, определяли сцинтилляционным счетом, как описано
над. Чтобы изучить влияние промывания немеченым CAN-296 на связывание [ 3 H]CAN-296 с фрагментами клеточной стенки, использовали 150-кратный избыток немеченого CAN-296.
добавляют на 60 мин инкубации.Аликвоты фракции клеточной стенки удаляли в разное время.
интервалы до и после добавления немаркированного CAN-296. Фрагменты клеточной стенки были
собирают, промывают 30 мМ трис-буфером (pH 7,0) центрифугированием и связывают с радиоактивностью
с фрагментами клеточной стенки определяли сцинтилляционным счетом.

Результаты

Ингибирование противогрибковой активности CAN-296 кальцием и другими двухвалентными катионами

Влияние различных катионов на противогрибковую активность CAN-296 на C.albicans исследовали путем добавления различных количеств соответствующих хлоридов металлов к
среду с добавлением ингибирующей концентрации CAN-296 (10 мг/л). Как показано
в Таблице I кальций, магний и литий в концентрациях ≥0,625
г/л ингибирует противогрибковое
активность CAN-296, и полное ингибирование активности CAN-296 в отношении C. albicans было получено при 1,25 г/л. Барий, кобальт и марганец ингибировали CAN-296 только при относительно
Высокая концентрация (2.5 г/л), тогда как медь и калий не влияли на активность
CAN-296 в используемых концентрациях. В этих опытах катионы присутствовали одновременно
с CAN-296 в течение всего периода роста. Только катионы в указанных концентрациях
не оказал существенного влияния на рост C. albicans .

Удаление кальция из предварительно обработанного раствора CAN-296 путем диализа при 4°C в течение ночи
полностью восстановила противогрибковую активность соединения.Обработка кальцием и диализ
а также необработанный кальцием, но подвергнутый диализу CAN-296 убил примерно 99% клеток C. albicans . Напротив, обработанный кальцием CAN-296 был неактивен (0% уничтожения). Данные также свидетельствуют о том, что
влияние кальция на CAN-296 является прямым и что связывание кальция с CAN-296 достаточно слабое
для удаления кальция диализом.

Опосредованная CAN-296 агрегация C. albicans

Интактные клетки C. albicans агрегировали и образовывали скопления в присутствии
MIC и более высокие концентрации CAN-296.Микроскопическое исследование интактных клеток в
присутствие CAN-296 в различные промежутки времени показало, что агрегатообразование достигло
плато в течение 60 мин. Добавление кальция (1–5 г/л) полностью ингибировало
CAN-296-индуцированная агрегация клеток.

Исследования связывания CAN-296

На рис. 1а показано поглощение/связывание CAN-296 с интактным C.
albicans
клеток. То
поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 было быстрым и достигло плато в течение 40
мин.На рисунке 1b показано, что поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 клетками C. albicans было
концентрация зависела в диапазоне 0,5–3 мг/л и достигала максимума при
3–5 мг/л. Однако при концентрации 10 мг/л мы наблюдали резкое снижение
радиоактивность, связанная с интактными клетками.

В дополнение к интактным клеткам мы также исследовали связывание [ 3 H]CAN-296 с фракциями клеточной стенки C. albicans , и результаты были
по сравнению с полученными для интактных клеток.Как показано на рисунке
2, поглощение/связывание CAN-296 интактными клетками и фракцией клеточной стенки было очень
аналогичный.
Добавление 150-кратного избытка немеченого CAN-296 в середине инкубации не помогло.
значительно уменьшить меченный радиоактивным изотопом CAN-296, связанный либо с интактными клетками, либо с
фракция клеточной стенки. Отсутствие вытеснения связанного радиоактивно меченого CAN-296 при избытке
немеченого CAN-296 предполагает, что этот агент связывается с интактными клетками и фракцией клеточной стенки
С.albicans очень плотно.

Влияние кальция на поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 интактными клетками C. albicans показано в Таблице II. Кальций ингибировал поглощение/связывание меченого радиоактивным изотопом CAN-296.
до клеток C. albicans в зависимости от концентрации во времени. При 5,5 г/л кальций ингибировал
связанную с клетками радиоактивность примерно на 95% после 60 мин инкубации (табл.
II).

Обсуждение

CAN-296 представляет собой встречающуюся в природе термостабильную молекулу сложного углевода с
молекулярная масса около 4300 Да. Обладает превосходной активностью in vitro против широкого спектра
спектр патогенных дрожжей, включая устойчивые к флуконазолу и устойчивые к амфотерицину В
изолирует. Действие CAN-296 на грибковые клетки быстрое, зависит от концентрации и приводит к летальному исходу.
Эксперименты с кривой гибели показали, что CAN-296 в дозе 10 мг/л убил >99,9% клеток C. albicans в течение 60 минут, а измерения МИК не отличались от минимальной летальности.
концентрации более чем в два раза для всех протестированных видов Candida . 1

Из-за относительно большого размера и наличия сильно заряженных остатков маловероятно
что это соединение будет легко проникать через клеточную мембрану и накапливаться внутри клетки.
Следовательно, способ действия этого соединения, ответственный за его противогрибковую активность, может заключаться в
его способность воздействовать на субклеточный(е) компонент(ы) или молекулы, важные для функции клетки, но
доступны извне клетки. Быстрое действие CAN-296 в низких концентрациях на С.albicans также предполагает такую ​​возможность.

Было обнаружено, что поглощение/связывание CAN-296 клетками C. albicans
зависит от концентрации до 5 мг/л. При 10 мг/л мы наблюдали снижение поглощения/связывания,
которое было воспроизведено в трех независимых определениях. Этот спад трудно объяснить,
но, возможно, это связано с быстрой гибелью клеток, которая, как известно, происходит в течение 30 минут при этом
концентрация препарата. Мы подозреваем, что при 10 мг/л клетки погибают так быстро, что
недостаточно времени для накопления максимального количества соединения.

Хотя существует несколько вероятных кандидатов на роль мишени CAN-296 (например, синтез клеточной стенки
ферменты, перекачивающие протоны АТФазы) для действия этого сложного углевода ничего
известно о способе действия в настоящее время. Наши результаты показывают, что CAN-296 связывается с
клеточной стенки грибов, которая также содержит сложные углеводы, и действие CAN-296 может
связаны с распознаванием и взаимодействием углеводов. Значение углеводов в
посредничество биологических функций получает все большее признание. 2 Однако большинство данных по гликобиологии относится к
взаимодействия белков с олигосахаридами, и относительно мало известно о
углевод-углеводные взаимодействия. С другой стороны, многие животные лектины содержат
домены распознавания углеводов (CRD), 6 , которые распознают различные сахара. Связывание маннозы
белок, например, представляет собой сывороточный лектин, который связывается с поверхностью дрожжей и бактерий и
опосредует врожденный иммунный ответ. 2 ,7 Распознает и
связывается с маннозой, N -ацетилглюкозамином и l-фукозой примерно с равными
родство. 8 Другие лектины, такие как лектин куриной печени, проявляют
гораздо более высокая специфичность. 9 Частично это достигается за счет кластеризации нескольких CRD,
каждый со своим собственным сайтом связывания сахара. В случае макрофагального маннозного рецептора полная
сродство к маннану дрожжей может быть достигнуто только при наличии пяти из восьми CRD. 10

Было обнаружено, что кальций ингибирует активность CAN-296 на трех различных уровнях, с ингибированием
фунгицидная активность, агрегация и связывание CAN-296 с клеточной стенкой. Мы не
подробно исследовали взаимосвязь между агрегацией, индуцированной CAN-296, и ее
фунгицидная активность. Мы наблюдали разницу в кинетике гибели клеток и агрегации.
Гибель клеток наблюдалась в течение 15–30 мин 1 , тогда как агрегация выходила на плато только через 60 мин,
предполагая, что CAN-296-индуцированная агрегация C.albicans может не иметь отношения к его
фунгицидная активность и наблюдаемое снижение КОЕ в основном связаны с гибелью клеток, а не
агрегация клеток.

Многим лектинам для связывания требуется кальций (лектины С-типа). В месте связывания этих
Лектины С-типа, специфические экваториальные гидроксильные группы олигосахаридов действуют как координационные лиганды
и связываются с Ca 2+ . Некоторые противогрибковые
было обнаружено, что агенты, такие как прадимицины, специфически связываются со стенкой дрожжей в присутствии
кальция. 11 Это связывание через сайт связывания d-маннопиранозида похоже на сахароспецифическое действие лектинов C-типа. 12 ,13 В отличие от
стимулирование активности прадимицина кальцием, противогрибковая активность CAN-296 была
ингибируется кальцием. Тем не менее, наблюдение, что кальций ингибирует связывание CAN-296 с
клеточная стенка грибка повышает вероятность того, что, как и прадимицины, CAN-296 может обладать
сайт связывания кальция.

Также известно, что кальций и магний ингибируют ряд
взаимодействия аминогликозидов с мембранами, в том числе с бактериями, плазмой и
субклеточные мембраны. 14 ,15
сайты взаимодействия аминогликозида с мембраной были идентифицированы как кислые
фосфолипиды мембраны, 16 ,17 и связывание
происходит из-за взаимодействия заряда между этими поликатионными антибиотиками и анионными головными группами
кислых фосфолипидов.Неудивительно, что в ряде исследований показано, что
двухвалентные катионы могут препятствовать этим реакциям и защищать от нейротоксических, нефротоксических
и ототоксические эффекты этих антибиотиков. Подобные механизмы могут действовать при связывании
кальция к CAN-296.

Таким образом, наши наблюдения, что CAN-296 связывается с клеточной стенкой C. albicans и что это связывание может быть обратимо ингибировано кальцием и другими двухвалентными катионами, предполагают
что CAN-296 может иметь сайты связывания лектинов и кальция, и что его способ действия может
включают взаимодействие с компонентом(ами) клеточной стенки или клеточной мембраны.

Таблица I.

Влияние хлоридов металлов на противогрибковую активность CAN-296 в отношении C. albicans

91 682

91 682

. Процент ингибирования a 6sem противогрибковой активности
CAN-296 (10 мг/л) на C. albicans в присутствии различных концентраций (г/л)
хлориды металлов
.
Хлорид металла
.
0,312
.
0,625
.
1,25
.
2,5
.
a Ингибирование в процентах = (КОЕ i /КОЕ c )
×
100, где КОЕ и — количество колониеобразующих единиц, полученных в присутствии
10 мг/л CAN-296 с различными концентрациями хлорида металла и КОЕ c
количество колониеобразующих единиц, полученных в отсутствие препарата и катиона (контроль роста).
BaCl + 2 0 0 0 64 ± 1,66
CaCl + 2 0 17,6 ± 1,06 100 ± 2,51 104 ± 1,52
CoCl 4 0 0 0 55,5 ± 0,44
CuCl 2 0 0 0 0
KCl 0 0 0 0
LiCl 5. 8 ± 0,54 52,9 ± 2,51 118 ± 1,68 127 ± 2,67
MnCl 3 0 0 0 120 ± 1,48
MgCl 2 0 12,6 ± 1,25 100 ± 2,07 114 ± 1,51

+

+

. Процент ингибирования a 6sem противогрибковой активности
CAN-296 (10 мг/л) на С.albicans в присутствии различных концентраций (г/л)
хлориды металлов
.
Хлорид металла
.
0,312
.
0,625
.
1,25
.
2,5
.
a Ингибирование в процентах = (КОЕ i /КОЕ c )
×
100, где КОЕ и — количество колониеобразующих единиц, полученных в присутствии
10 мг/л CAN-296 с различными концентрациями хлорида металла и КОЕ c
количество колониеобразующих единиц, полученных в отсутствие препарата и катиона (контроль роста).
BaCl + 2 0 0 0 64 ± 1,66
CaCl + 2 0 17,6 ± 1,06 100 ± 2,51 104 ± 1,52
CoCl 4 0 0 0 55,5 ± 0,44
CuCl 2 0 0 0 0
KCl 0 0 0 0
LiCl 5.8 ± 0,54 52,9 ± 2,51 118 ± 1,68 127 ± 2,67
MnCl 3 0 0 0 120 ± 1,48
MgCl 2 0 12722

12.6 ± 1.25 100 ± 2.07 114 ± 1,51

Таблица I.

Влияние металлических хлоридов на противогрибковую активность CAN-296 на C. albicans

91 682

91 682

. Процент ингибирования a 6sem противогрибковой активности
CAN-296 (10 мг/л) на C. albicans в присутствии различных концентраций (г/л)
хлориды металлов
.
Хлорид металла
.
0,312
.
0,625
.
1,25
.
2,5
.
a Ингибирование в процентах = (КОЕ i /КОЕ c )
×
100, где КОЕ и — количество колониеобразующих единиц, полученных в присутствии
10 мг/л CAN-296 с различными концентрациями хлорида металла и КОЕ c
количество колониеобразующих единиц, полученных в отсутствие препарата и катиона (контроль роста).
BaCl + 2 0 0 0 64 ± 1,66
CaCl + 2 0 17,6 ± 1,06 100 ± 2,51 104 ± 1,52
CoCl 4 0 0 0 55,5 ± 0,44
CuCl 2 0 0 0 0
KCl 0 0 0 0
LiCl 5. 8 ± 0,54 52,9 ± 2,51 118 ± 1,68 127 ± 2,67
MnCl 3 0 0 0 120 ± 1,48
MgCl 2 0 12,6 ± 1,25 100 ± 2,07 114 ± 1,51
. Процент ингибирования a 6sem противогрибковой активности
CAN-296 (10 мг/л) на С.albicans в присутствии различных концентраций (г/л)
хлориды металлов
.
Хлорид металла
.
0,312
.
0,625
.
1,25
.
2,5
.
a Ингибирование в процентах = (КОЕ i /КОЕ c )
×
100, где КОЕ и — количество колониеобразующих единиц, полученных в присутствии
10 мг/л CAN-296 с различными концентрациями хлорида металла и КОЕ c
количество колониеобразующих единиц, полученных в отсутствие препарата и катиона (контроль роста).
BaCl + 2 0 0 0 64 ± 1,66
CaCl + 2 0 17,6 ± 1,06 100 ± 2,51 104 ± 1,52
CoCl 4 0 0 0 55,5 ± 0,44
CuCl 2 0 0 0 0
KCl 0 0 0 0
LiCl 5.8 ± 0,54 52,9 ± 2,51 118 ± 1,68 127 ± 2,67
MnCl + 3 0 0 0 120 ± 1,48
MgCl + 2 0 12,6 ± 1,25 100 ± 2,07 114 ± 1,51

Таблица II.

Влияние хлорида кальция на поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 с интактным C. albicans клеток

. [ 3 H]CAN-296 поглощается/связывается с клетками C. albicans (cpm 6sem ×
10 4 /10 7 ячеек) в различные промежутки времени (мин)
.
Кальций
хлорид (г/л)
.
15
.
30
.
45
.
60
.
0 48 ±
0.87 
58 ±
1,32
70,5 ±
0,13
80 ±
2,23
1,1 19,5 ±
0,27
29 ±
1,77
25,9 ±
0,12
26,5 ±
0,64
2,2 10 ±
0,07
11 ±
0,02
13 ±
0,43
12,75 ±
0,09
5,5 5,5 ±
0,37
4,5 ±
0,02
4.15 ±
0,02
4,2 ±
0,1
. [ 3 H]CAN-296 поглощается/связывается с клетками C. albicans (cpm 6sem ×
10 4 /10 7 ячеек) в различные промежутки времени (мин)
.
Кальций
хлорид (г/л)
.
15
.
30
.
45
.
60
.
0 48 ±
0,87
58 ±
1,32
70,5 ±
0,13
80 ±
2,23
1,1 19,5 ±
0,27
29 ±
1,77
25,9 ±
0,12
26,5 ±
0,64
2,2 10 ±
0,07
11 ±
0,02
13 ±
0,43
12,75 ±
0.09
5,5 5,5 ±
0,37
4,5 ±
0,02
4,15 ±
0,02
4,2 ±
0,1

Таблица II.

Влияние хлорида кальция на поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 интактными клетками C. albicans

. [ 3 H]CAN-296 поглощается/связывается с клетками C. albicans (cpm 6sem ×
10 4 /10 7 ячеек) в различные промежутки времени (мин)
.
Кальций
хлорид (г/л)
.
15
.
30
.
45
.
60
.
0 48 ±
0,87
58 ±
1,32
70,5 ±
0,13
80 ±
2,23
1,1 19,5 ±
0,27
29 ±
1,77
25,9 ±
0.12 
26,5 ±
0,64
2,2 10 ±
0,07
11 ±
0,02
13 ±
0,43
12,75 ±
0,09
5,5 5,5 ±
0,37
4,5 ±
0,02
4,15 ±
0,02
4,2 ±
0,1
. [ 3 H]CAN-296 поглощается/связывается с клетками C. albicans (cpm 6sem ×
10 4 /10 7 ячеек) в различные промежутки времени (мин)
.
Кальций
хлорид (г/л)
.
15
.
30
.
45
.
60
.
0 48 ±
0,87
58 ±
1,32
70,5 ±
0,13
80 ±
2,23
1,1 19,5 ±
0,27
29 ±
1,77
25,9 ±
0.12 
26,5 ±
0,64
2,2 10 ±
0,07
11 ±
0,02
13 ±
0,43
12,75 ±
0,09
5,5 5,5 ±
0,37
4,5 ±
0,02
4,15 ±
0,02
4,2 ±
0,1

Рисунок 1.

(Поглощение [ 3 H]CAN-296 (5
мг/л) в C. albicans в зависимости от времени (а) и поглощения в зависимости от концентрации
препарата (б).)

Рисунок 1.

(Поглощение [ 3 H]CAN-296 (5
мг/л) в C. albicans в зависимости от времени (а) и поглощения в зависимости от концентрации
препарата (б)

Рисунок 2.

(Эффект стирки с немаркированным
CAN-296 на поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 в интактных клетках (а) и
фракция клеточной стенки (b) C. albicans . Стрелка указывает время добавления
150-кратный избыток немеченого CAN-296.Аликвоты клеточной суспензии и клеточной стенки
фракции удаляли до и после добавления немеченого CAN-296 в указанном количестве.
интервалы времени, а радиоактивность, связанная с интактными клетками или фракцией клеточной стенки, была
определяют, как описано в разделе «Материалы и методы». • промыты немаркированными
CAN-296; ▪, немытый.)

Рисунок 2.

(Влияние стирки с немаркированным
CAN-296 на поглощение/связывание [ 3 H]CAN-296 в интактных клетках (а) и
фракция клеточной стенки (b) C. альбиканс . Стрелка указывает время добавления
150-кратный избыток немеченого CAN-296. Аликвоты клеточной суспензии и клеточной стенки
фракции удаляли до и после добавления немеченого CAN-296 в указанном количестве.
интервалы времени, а радиоактивность, связанная с интактными клетками или фракцией клеточной стенки, была
определяют, как описано в разделе «Материалы и методы». • промыты немаркированными
CAN-296; ▪, немытый.)

Каталожные номера

1.

Бен-Джозеф, А. М., Манавату, Э. К., Платт, Д. и Собел, Дж.
Д. (

1997

). Противогрибковая активность CAN-296 in vitro: встречающийся в природе комплекс
углевод.

Журнал антибиотиков

50

,

937

–43. 2.

Дрикамер, К. и Тейлор, М.Э. (

1993

).
Биология лектинов животных.

Ежегодный обзор клеточной биологии

9

,

237

–64. 3.

Морелл А. Г., Ирвин Р. А., Штернлиб И., Шейнберг И.
Х. и Эшвелл, Г. (

1968

). Физико-химические исследования церулоплазмина: В.
Метаболические исследования церулоплазмина, не содержащего сиаловую кислоту, in vivo.

Журнал биологических
Химия

243

,

155

–9. 4.

Шталь П., Шлезингер П. Х., Сигардсон Э., Родман Дж. С.
и Ли, Ю. К. (

1980

). Рецептор-опосредованный пиноцитоз гликоконъюгатов маннозы
макрофагами: характеристика и доказательства рециркуляции рецепторов.

Сотовый

19

,

207

–15. 5.

Фишер, Х. Д., Гонсалес-Норьега, А., Слай, В. С. и
Морре, DJ (

1980

). Фосфоманнозил-ферментные рецепторы в печени крыс. субклеточный
распределение и роль во внутриклеточном транспорте лизоцимальных ферментов.

Журнал
Биологическая химия

255

,

9608

–15. 6.

Ли, Ю. К. (

1992

).Биохимия
углеводно-белковое взаимодействие.

Журнал FASEB

6

,

3193

–200. 7.

Дриккамер, К. (

1996

). Ca
2+ -зависимое распознавание сахара лектинами животных.

Биохимическое общество
Сделки

24

,

146

–50. 8.

Ли, Р. Т., Итикава, Ю., Фэй, М., Дрикман, К., Шао,
MC & Lee, YC (

1991

).Лиганд-связывающие характеристики крысиной сыворотки
белок, связывающий маннозу (MBP-A). Гомология архитектуры сайта связывания с млекопитающими и
куриные печеночные лектины.

Журнал биологической химии

266

,

4810

–15. 9.

Леб, Дж. А. и Дрикамер, К. (

1988

).
Конформационные изменения рецептора цыпленка для эндоцитоза гликопротеинов. Модуляция
лиганд-связывающая активность по Ca 2+ и рН.

Журнал биологической химии

263

,

9752

–60. 10.

Дрикамер, К. (

1993

). Признание
сложные углеводы с помощью Ca 2+ -зависимых лектинов животных.

Биохимический
Сделки общества

21

,

456

–9. 11.

Савада Ю., Нумата К., Мураками Т., Танимичи Х.,
Ямамото С. и Оки Т. (

1990

).Кальцийзависимое антикандидозное действие
прадимицин А.

Журнал антибиотиков

43

,

715

–21. 12.

Уэки Т., Нумата К., Савада Ю., Накадзима Т.,
Фукагава Ю. и Оки Т. (

1993

). Исследования противогрибкового действия прадимицина
антибиотики. I. Имитирующее лектин связывание BMY-28864 с маннаном дрожжей в присутствии кальция.

Журнал антибиотиков

46

,

149


61. 13.

Уэки Т., Нумата К., Савада Ю., Нисио М., Окума,
Х., Тода, С. и др. (

1992

). Исследования на противогрибковые
действия прадимициновых антибиотиков. II. Сайт связывания d-маннопиранозида и кальций
сайт связывания.

Журнал антибиотиков

46

,

455

–64. 14.

Хьюмс, Х.Д., Састрасин, М. и Вайнберг, Дж.М. (

1984

). Кальций является конкурентным ингибитором гентамицин-почечной мембраны.
связывающие взаимодействия и диетические добавки кальция защищают от гентамицина
нефротоксичность.

Журнал клинических исследований

73

,

134

–47. 15.

Вайнберг, Дж. М. и Хьюмс, Д. Х. (

1980

).
Механизмы гентамицин-индуцированной дисфункции почечных митохондрий. I. Влияние на
митохондриальное дыхание.

Архив биохимии и биофизики

205

,

222

–31. 16.

Sastrasinh, M., Knauss, T.C., Weinberg, J.M.&
Хьюмс, HD (

1982

). Идентификация сайта связывания аминогликозидов в почках крыс.
щеточные бордюрные мембраны.

Журнал фармакологии и экспериментальной терапии

222

,

350

–8.